FTSJ1通过催化tRNA甲氧基腺苷修饰调控DRAM1表达抑制非小细胞肺癌的机制研究.pdfVIP

FTSJ1 通过催化tRNA 甲氧基腺苷修饰调控DRAM1 表达抑制非小细胞肺癌的机制研究 摘 要 背景：非小细胞肺癌(NSCLC)是世界上造成癌症患者死亡的最主要原因。转运 RNA (tRNA)修饰是一种新发现的致癌调控机制。然而，tRNA 修饰在NSCLC 中的作用尚不 清楚。 方法：采用高效液相色谱-质谱法测定非小细胞肺癌癌组织和NSCLC 细胞中tRNA 修饰 的水平。采用比较基因组学方法鉴定tRNA 修饰基因并用qRT-PCR 分析进行定量验证。 用体外细胞表型实验及体内动物实验分析tRNA 修饰基因在NSCLC 中的生物学功能。 通过RNA-seq、qRT-PCR 、rescue assays 等方法探讨tRNA 修饰基因在NSCLC 中的作用 机制。 结果：与正常组织相比，NSCLC 肿瘤组织中共有 18 种tRNA 修饰水平和7 种tRNA 修 饰基因表达水平显著下调，其中甲氧基腺苷2-O-methyladenosine (Am)在癌组织中修饰 水平最低。通过酵母tRNA 修饰基因同源序列比对得出人的FTSJ1 具有修饰Am 的功能。 细胞功能实验显示，FTSJ1 过表达促进NSCLC 细胞内tRNAs 分子Am 水平的增高，抑 制FTSJ1 的表达可降低tRNAs 分子Am 的修饰水平。FTSJ1 的表达上调抑制了NSCLC 细胞的增殖、迁移，促进了细胞的凋亡。敲低FTSJ1 的表达后则产生相反的效果。裸鼠 荷瘤实验证实过表达FTSJ1 明显抑制了NSCLC 细胞形成的肿瘤生长。机制研究发现， FTSJ1 在 NSCLC 细胞内表达上调可抑制 DRAM1 的表达。反之敲低 FTSJ1 后可导致 DRAM1 表达增强。此外，敲低DRAM1 的表达可显著增强FTSJ1 过表达对NSCLC 细 胞增殖的抑制作用。 结论：本研究提示tRNA 修饰是非小细胞肺癌的重要发病机制。研究结果还证实了FTSJ1 在非小细胞肺癌细胞中同时具有tRNA 的 Am 修饰酶和肿瘤抑制因子的双重作用。 关键词：tRNA 修饰、甲氧基腺苷、非小细胞肺癌、FTSJ1 、DRAM1 I FTSJ1 regulates tRNA 2-O-methyladenosine modification and suppresses the malignancy of NSCLC via inhibiting DRAM1 Abstract Background: Non-small cell lung cancer (NSCLC) is the leading cause of cancer mortality worldwide. Transfer RNA (tRNA) modification is an emerging regulatory mechanism for carcinogenesis. However, the role of tRNA modification in NSCLC remains unclear. Methods: Quantitative HPLC-MS assay was used to determine tRNA modifications in NSCLC tissues and cells. tRNA-modifying enzyme genes were identified by comparative genomics and validated by qRT-PCR analysis. The biological functions of tRNA-modifying gene in NSCLC were investigated in vitro and in vivo. The mechanisms of tRNA-modifying gene in NSCLC were explored by RNA-seq, qRT-PCR, and rescue ass