最新高效液相色谱仪期间核查规程汇编.docxVIP

高效液相色谱仪期间核查方法 一、 依据和目的 保证高效液相色谱仪的正常运行，在两次检定 /校准之间进行期间核查，验 证该设备是否保持检定/校准时的状态，确保其检验数据的有效性和准确性。 二、 使用范围 该运行检查方法适用于使用中的 1200高效液相色谱仪的期间核查检查方 法。 三、 基本原理 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支， 以液体为流动相，采用高压输液系 统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、 缓冲液等流动相泵入装 有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对 试样的分析。 四、 仪器工作条件及要求 1、 环境温度：15?35C 环境湿度：＜ 75RH% 2、 室内无强磁场十扰； 3、 室内部不存在妨碍仪器正常工作的震动； 4、 室内活洁，无腐蚀性气体； 5、 稳压器正常，并保持良好接地； 6、 供电电源：交流电压 220V± 10%; 7、 排风设备完好，排风量达到实验要求； 8、 仪器放置在坚固的实验台上，并避免阳光直射。 五、 核查方法 1、通用技术要求 检查贮液器是否活洁； 检查滤头是否堵塞; 检查仪器电源线、信号线等插接是否紧密； 检查各开关、旋钮、按键等功能是否正常，指示灯是否灵敏； 将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min ,启动仪器, 待压力平稳后保持10min,用滤纸检查各管路接口应无湿迹 2、泵流量设定值误差SS、流量稳定性误差的检定 SR 分别设定流量为0.5 mL/min、1.0 mL/min、2.0 mL/min ,启动仪器，压力稳定 后，在流动相出口处用事先活洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时， 收集5 min流出的流动相，在分析天平■上称重，按式（1 ）、式（2 ）计算Ss和 Sr o Ss =（耳-Fs）/Fsd00% （1） Sr =（Fm -Fin）/FmXl00% （2） 式中：Fm——Fm =W2 -W y（P*t）,流量实测值,mL/min； W2 容量瓶+流动相的质量，g; W 容量瓶的质量，g; P——试验温度下流动相的密度，g/mL ； t 收集流动相的时间，min； Fm 同一组测量的算术平■均值， mL/min ； Fs 流量设定值，mL/min； Fm 同一组测量中流量最大值，mL/min ； Fin 同一组测量中流量最小值，mL/min ； 流里设正值，mL/min 0.5 1.0 1.5 测量次数 3 3 3 收集流动相时间，min 5 5 5 允许误差 Ss 5% 3% 2% Sr 3% 2% 2% 3、基线噪声和基线漂移 选用Ci8色谱柱，以甲醇：0.02mol/L乙酸铉=5: 95为流动相，流速为1.0 mL/min ,紫外检测器的波长选在230nm,检测灵敏度调到最灵敏档，开机预热， 待仪器稳定后记录基线10 min,由检测器的衰减倍数和测得的基线峰-峰高对应 标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示。 Nd = KB ⑶ 式中：Nd——检测器基线噪声； K ——衰减倍数； B ——测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU。 基线漂移用1小时内基线偏离原点的值（AU/ h）表示。看基线噪声是否不超过 5X 10-4AU,基线漂移是否不超过5X 10-3AU/ h 4、整机性能（定性、定量重复性） 选用C18色谱柱，根据检测器选择流动相和测量参数：以甲醇： 0.02mol/L乙 酸铉=5: 95为流动相，流速为1.0 mL/min,紫外检测器的波长选在230 nm,基 线稳定后由进样器注入20 L的25 H g/mL苯甲酸标准溶液，连续测量6次，记 录色谱峰的保留时间和峰面积。按式（5）计算相对标准偏差RSD。 6 - 2 1 RSD 定性（定量））=2 （Xi -x）2/（6-1）二00% （4） 式中：RSD（定性（定量））一一定性（定量）测量重复性相对标准偏差； Xi——第i次测量的保留时间或峰面积； x 6次测量结果的算术平■均值； i——测量序号。 六、结果处理 对仪器核查结果，应填写仪器设备期间核查记录。如果该仪器已经偏离校准 状态，应查找原因，并采取维修、重新检定或停用、报废等相应措施，维修后的 仪器经检定或核查达到技术性能要求后方能投入使用。