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文档来源为 :从网络收集整理 .word 版本可编辑 .欢迎下载支持 . 邻二氮菲测铁实验报告 篇一：邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告 实验一、邻二氮菲分光光度法测定微量铁 XX级医学检验 3 组 吴茳铃 XX221885 实验目的和要求 1、 掌握紫外可见分光光度计的基本操作； 2、 掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法； 3、 掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择； 4 、 掌握标 准曲线绘制及应用。 实验原理 邻二氮菲（ 1,10 —邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可 与 Fe 形成红色配位离子 2+ Fe 2+ 2+ + 3 N N Fe 3 1 文档来源为 :从网络收集整理 .word 版本可编辑 .欢迎下载支持 . 在 pH=3~9 范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在 510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为 1.1 × 104，反应十分灵敏， Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收 定律，适合于微量铁的测定。 实验中，采用 pH=4.5-5 的缓冲溶液保持标准系列溶液 及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶 液中的 Fe3+并防止测定过程中 Fe2+被空气氧化。 实验仪器与试剂 752S 型分光光度计 2. 标准铁储备溶液（ 1.00 × 10-3mol/L ） 3. 邻二氮菲溶液（ 0.15%，新鲜配制） 4. 盐酸羟胺溶液（ 10%，新鲜配制） 5. NaAC 缓冲溶液 6. 50ml 容量瓶 7 个 8.1cm 玻璃比色皿 2 个 9. 铁样品溶液 实验步骤 1、 标准系列溶液及样品溶液配制，按照下表配制铁标 准系列溶液及样品溶液。 用 1cm比色皿，以 1 号溶液作为参比溶液，测定 4 号溶 液在各个波长处的吸光度，绘制吸收曲线，并找出最大吸收 波长。 绘图如下： 选择的最大吸收波长为：λ max = 510nm 3、 标准曲线制作 在选定最大吸收波长处，用 1cm比色皿，以 1 号溶液作 2 文档来源为 :从网络收集整理 .word 版本可编辑 .欢迎下载支持 . 为参比溶液，分别测定 2 至 7 号溶液的吸光度，平行测定 3 次，计算吸光度平均值，绘制标准曲线。 绘制标准曲线： 实验数据处理 1、 样品中铁的计算 Cx=C读取值× 50.00/2.50=0.05 × 20=1× 10(mol/L) 2、 摩尔吸光系数计算 在标准曲线的直线部分选择量两点，读取对应的坐标值， 计算邻二氮菲配位物在最大吸收波长出的摩尔吸光系数： ε =(A2 － A1)/(c2 － c1)=(0.461 — 0.233)/(0.04 × 10-3 —0.02 ×10-3)=1.14 × 104L/(mol ·cm) -3 实验讨论 1、 查资料红色配位物的摩尔吸光系数与实验计算一致， 影响成败的关键可能有：标准液和样品液的配置不准、分光 光度计使用不当。 2、 比色皿在换装不同浓度的溶液时，必须用待测的溶 液润洗至少三次。 3 、 注意分光光度计的正确操作。 4、 PH 值影响配位物的解离程度，故缓冲液要适量。 5、 比色皿放入分光光度计样品室钱，必须用吸收纸将 表面擦拭干净。 指导老师：颜玉蓉 3 文档来源为 :从网络收集整理 .word 版本可编辑 .欢迎下载支持 . 时间：XX 年10月 篇二：综合实验报告 邻二氮菲分光光度法测定微量铁邻二氮菲分光光度法测定微量铁 一、实验目的 ⒈学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法 测定微量铁的方法原理； ⒉掌握 721 型分光光度计的使用 方法，并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 ⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择。对显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容。 ⒉如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。 ⒊本试验测定工业盐酸中铁含量的原理：根据朗伯－比 耳定律： A=ε bc。当入射光波长λ及光程 b 一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度 A 与该物质的浓度 c 成正比。 4 文档来源为 :从网络收集整理 .word 版本可编辑 .欢迎下载支持 . 只要绘出以吸光度 A 为纵坐标，浓度 c 为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度