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临床色谱质谱检验技术:第六章 色谱质谱技术的其他常见应用(三).ppt

临床色谱质谱检验技术:第六章 色谱质谱技术的其他常见应用(三).ppt

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* * * * * 质谱扫描模式 肉碱和酰基肉碱检测(以衍生化前处理分析为例): 肉碱和酰基肉碱经碰撞诱导裂解后产生具有共同结构的子离子(m/z 85); 因有相同的子离子,采用母离子扫描 三重四级杆技术应用于遗传代谢性疾病检测 总离子流色谱图(TIC) 优化色谱条件:平台期至少10个扫描点,且峰形稳定; 优化质谱条件:TIC响应稳定 三重四级杆技术应用于遗传代谢性疾病检测 二级质谱图分析 Ala: m/z 146.3 Leu: m/z 188.2 Phe: m/z 222.2 C2: m/z 260.6 Gly: m/z 132.1/76.1 三重四级杆技术应用于遗传代谢性疾病检测 三重四级杆技术应用于遗传代谢性疾病检测 三重四级杆技术应用于遗传代谢性疾病检测 三重四级杆技术应用于遗传代谢性疾病检测 1、针刺采血部位<2.0 mm 2、热敷采血 部位3-5分钟 3、消毒并拭 干采血部位 4、针刺采血, 拭去第一滴血 5、单面轻压滤纸取血浸透点样环 6、按采样单 要求连续取血 标本类型: 干血斑滤纸片 说明: 新生儿以外的对象可以是手指末梢血、 静脉血制成的滤纸干血片标本 样品制备 三重四级杆技术应用于遗传代谢性疾病检测 检测信息丰富:一次实验同时检测100余项指标和比值,可反映40余种遗传代谢病信息 高通量:约500例标本/天 高特异性:针对疾病的特征指标进行分析,减少假阳性 高灵敏度:肉碱含量 费用相对低廉 人员要求:仪器复杂,须经专门培训后方可进行操作及仪器维护等 自建项目(LDTs):缺少统一标准:使用试剂盒?自配试剂? 前处理操作:自动化程度低 实验室信息系统:数据统计分析,异常结果召回管理,阳性报告跟踪等 优势 难点 《临床色谱质谱检验技术》 小结与思考 熟悉三重四级杆技术应用于遗传代谢性疾病检测 熟悉质谱扫描模式的选择 Thank You! * 质谱分析:分离和检测带电物质的质量差异的一类分析方法。 质荷比:离子质量与原子质量单位的比值,去除以电荷数(不考虑正、负号)得到的商。 * 无机质谱主要有: ? 火花源质谱法? ? ? ? ? SSMS(很少用) ? 辉光放电质谱法? ? ? ? GDMS ? 二次离子质谱法? ? ? ? SIMS ? 电感耦合等离子体质谱? ICPMS? ? ? 热电质谱法? ? ? ? ? ? ? 同位素稀释质谱法? ? ? IDMS 同位素质谱:中国质谱学会成立以来,我们同位素质谱获得了重大发展。一大批从事同位素质谱工作的专家在同位素地质学、核科学和基础科学中取得了不少重要的研究成果。同位素质谱在我国农业、医学、环境 学、海洋学、石油、化工、冶金等方面的应用也日益广泛。近年来,同位素质谱学在高分辨率、高准确度、高灵敏度研究方面上了新的台阶,而且在同位素精确质量测定、化学溯源与世界水平接近。 * 气相色谱-质谱联用仪的组成部分:气相色谱单元(气路系统、进样系统、分离系统);质谱单元(离子源、质量分析器、检测器、真空系统);接口部件(直接导入型部件、开口分流型部件、喷射式浓缩型部件);数据处理系统。 液相色谱-质谱联用仪的组成部分:液相色谱部分:高压输液系统、进样系统、分离系统; 质谱部分:离子源、质量分析器、检测器、真空系统;数据处理系统。 * * * * * * 根据年龄28天为界限,分为临床患者(大于28日)和新生儿(小于等于28日)项目,各指标参考值不同。 * * * * * * * * * * * Confidentiality Label Confidentiality Label 第六章 色谱质谱技术 的其他常见应用 2016.05.03 《临床色谱质谱检验技术》 复习 《临床色谱质谱检验技术》 主要内容 质谱技术在临床实验室中的应用(二) 小结与思考 《临床色谱质谱检验技术》 复习 ICP-MS的技术特点? ICP-MS检测全血Pb中,加入硝酸和曲拉通的作用? 复习 复习 ICP-MS的技术特点 分析元素覆盖面广(可达73元素),分析速度快 检出限低(多数元素检出限为ppb-ppt级) 线性范围宽(可达9个数量级) 谱图干扰少(原子量相差1可以分离) 能进行同位素分析 多种进样技术联用 ?血液样品的特点: ?黏度大 ?基体复杂 ?含较多细小颗粒物 ?蛋白质容易沉降 ?检测过程易出现的问题: ?容易漂移 ?样品不均匀 ?易堵(雾化器) ?稳定性较差 复习 解决办法: ?选择合适的酸度和曲拉通浓度稀释样品: ?酸度(破坏红细胞):过小,红细胞破坏不完全;有些元素的等离子体行为受影响;过大,造成蛋白质沉降; ?曲拉通(防止样品沉降):浓度过小,不能有效地防止沉降;过大,溶液黏度大,容易起泡,造成精密度差。 复习 《临床色谱

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