细胞 膜通透性实验报告.doc

【实验题目】 细胞膜通透性实验 【实验目得】 1、观察溶血现象并掌握其发生机制、? ２、了解细胞膜得渗透性及各类物质进入细胞得速度。 【实验材料与用品】 1。?试剂:0、８5% NaＣｌ溶液、0、085% NaCl溶液、0。8mol/L甲醇溶液、0。8ｍoｌ/L丙三醇溶 　 　 　液、６％ 葡萄糖溶液、２％ TritonX-100? 　2.?器具:离心管、试管架、滴管、显微镜、离心机 3.?材料:鸡血红细胞 【实验原理】 　 细胞膜就是细胞与环境进行物质交换得选择性屏障,它就是一种半透膜,可选择性控制物质进出细胞。各种物质出入细胞得方式就是不同得,水就是生物界最普遍得溶剂,通透性高(肾小管、肠上皮、植物根细胞更高),水分子可以从渗透压低得一侧通过细胞膜向渗透压高得一侧扩散,这种现象称为渗透。渗透作用就是细胞膜得主要功能之一、 溶血现象 　　将红细胞放在低渗盐溶液中,水分子大量渗到细胞内使细胞涨破,血红蛋白释放到介质当中,介质由不透明得细胞悬液变为红色透明得血红蛋白溶液(此时得细胞膜收缩,会略有不溶性内容物),这种现象称为溶血。 　 红细胞在等渗盐溶液中短时间之内不会发生溶血,但就是由于红细胞得细胞膜对不同物质得通透性不同,时间久了,膜两侧得渗透压平衡会被打破,也会发生溶血。 　 由于各种溶质透过细胞膜得速度不同,因此发生溶血得时间也不相同、发生溶血现象所需得时间,可以作为测量某种物质进入红细胞速度得指标。即溶血时间对应着穿膜速度。 物质穿膜运输得类型 (1)被动运输(不耗能) 被动运输分为简单扩散(顺浓度梯度扩散)与协助扩散。(通道:载体蛋白、通道蛋白) 主动运输(耗能) 　 需要跨膜载体蛋白得协助,这些载体蛋白起到泵得作用,有选择性地把专一溶质逆浓度梯度得穿膜运输、 影响物质穿膜通透性得因素 脂溶性越大得分子越容易穿膜(非极性得物质比极性得物质更容易溶于脂类物质) 小分子比大分子更容易穿膜(小得非极性分子,如O２ 、CO2等) 不带电荷得分子容易穿膜(离子难溶于脂质物质,离子带水膜使体积增大) 亲水性分子与离子得穿膜要依赖于专一性得跨膜蛋白 　　 　 　 　 　　 　 　 　 　　 【实验步骤】 大体流程 6只试管分别滴加50%红细胞悬液1滴取6只试管分别加入等量得不同溶质配置50%得鸡血红细胞悬液　　 　　 　　　 　 　 6只试管分别滴加50%红细胞悬液1滴 取6只试管分别加入等量得不同溶质 配置50%得鸡血红细胞悬液 在显微镜下观察细胞形态混匀后,观察并记录溶血时间 在显微镜下观察细胞形态 混匀后,观察并记录溶血时间 具体操作 取鸡血6ml,加0、8５％NaCl溶液４ml,在１0０0r／mｉn条件下离心5分钟;(RBＣ压积量不 　 少于 0、6mol) 将上述离心后得红细胞按沉淀量配成5０%浓度;(总体积应不少于１.2ｍl) 每组取6支试管,分别加入如下溶液各3ml:　 (1)0、85％ＮaCｌ溶液　 (2)0、085％ＮaCl溶液 　 (3)０.8moｌ/Ｌ(0、３mol/L等渗)甲醇溶液 　 (４)０、8mol/Ｌ(0.3mｏl/L等渗)丙三醇溶液 (5)6%(5％等渗)葡萄糖溶液 (6)２％(1。5%等渗)TritonX—10０ 4。 向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液１滴,轻摇混匀,观察试管中就是否有溶血现象发生 (观察时间1小时),记录溶血时间,并于显微镜下观察各溶液得细胞、 【实验结果与分析】　 = 1 ＼* RＯＭAＮ \＊ ＭERGＥFORMAT Ｉ。实验结果 图1:0。８5% ＮａCl溶液 　　 图2:０、085% ＮaＣl溶液 图3:０。8moｌ/L甲醇溶液 　　 图４:丙三醇溶液(20min) 图5:丙三醇溶液(40ｍiｎ) 　 图6:丙三醇溶液(60min) 　 图7:葡萄糖溶液 　　 　 图8:ＴriｔｏｎＸ-100 = 2 \＊ RＯMAN ＼＊ MEＲGＥFＯＲMAT　ＩI。观察记录表 编号 溶液类型 就是否溶血 溶血时间 现象记录 １ 0。8５%　NaCｌ溶液 不溶血 / 溶液呈暗红色乳浊液,未发生溶血,作为对照组 2 0、０85％　ＮaCl溶液 完全溶血 6s 溶液呈鲜亮得红色,完全溶血,作为对照组。 3 ０。8ｍol/L甲醇溶液 完全溶血 3５s 溶液呈鲜亮得红色; 完成溶血得时间很短 4 0、8mｏｌ／L丙三醇溶液 不完全溶血 ２０ｍiｎ 溶液短时间内仍呈暗红色,透明度不高; 溶血速度缓慢,每隔10min进行观察,发现显微镜下个别细胞形态有所改变 ５ 6