生化室操作作业指导书.docx

生化室操作指导书 文件编号： 第一版 编制：田 审核： 批准： 生效日期：2007年8月8日 省立医院西院检验科 目录 序号 主题内容 代号 页号 1 血清丙氨酸氨基转移酶测定 2 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 3 血清总蛋白液体双缩脲法测定 4 血清白蛋白溴甲酚绿法测定 5 血清葡萄糖己糖激酶法测定 6 血清甘油三酯酶试剂法测定 7 血清总胆固醇酶试剂法测定 8 血清高密度脂蛋白胆固醇测定 9 血清尿酸TBHBA法测定 10 血清尿素氮谷氨酸测定 11 血清肌酐苦味酸法测定 12 血清钙测定 13 血清氯测定 14 血清总胆红素测定 15 血清直接胆红素测定 16 血清a -淀粉酶测定 17 脑脊液、尿液微量蛋白测定 18 血清钾测定 19 血清磷测定 20 血清胆碱酯酶测定 21 血清碱性磷酸酶测定 22 血清丫-谷氨酰转移酶测定 23 血清乳酸脱氢酶测定 24 血清胆碱酯酶测定  25 血清肌酸激酶测定 26 血清肌酸激酶同工酶测定 27 血清二氧化碳结合力测定 28 血清总胆汁酸测定 29 血清B 2-微球蛋白测定 30 血清低密度脂蛋白胆固醇测定 31 血清脂蛋白（a）测定 32 血清钠测定 33 34 35 36 血清丙氨酸氨基转移酶测定 实验原理 国际临床化学学会（IFCC）推荐的紫外连续监测法。 ALT L-丙氨酸 + -酮戊二酸 丙酮酸 + L-谷氨酸 十沁円皿 + LDH （乳酸脱氢酶） 一「皿 + 丙酮酸 + NADH + H _ . L-乳酸 + NAD + H 2O 上述偶联反应中，NADH的氧化速率与 样品中ALT的活力成正比，在340nm处 + . - NADH呈现特性吸收峰，而NAD则没有。因此，可在340nm监测吸光度的下降速率 （-△ A/min ）,计算出ALT的活性单位。 标本： 病人准备：12小时禁食。 类型：血清，肝素或EDTA血浆。 标本存放：3天内的活性损失：2?8 C保存：＜10% ; 15?25 C保存：＜17% ;标 本稳定性：-20 C保存至少可稳定4周。 标本运输：常温条件下保存运输。 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。 实验材料 试剂欧泰克ALT测定试剂盒 试剂组成 Tris 缓冲液 pH 7.4 80mmol/L L-丙氨酸 800mmol/L LDH （乳酸脱氢酶） ＞ 1200U/L a-酮戊二酸 18mmol/L NADH 0.18mmol/L 试剂准备：试剂为即用式。 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2?8 C,若无污染，可稳定至失效期。试 剂不可冰冻。 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有 沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L ）为防腐剂。不可入口！避免接触皮 肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。 校 准 品 ： 使 用 罗 氏 公 司 提 供 的 校 准 品 对 自 动 分 析 仪 进 行 校 准 ， 具 体 参 见 生 化 检验校准品和质控品.SOP文件。 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 仪器 ： 日立 7060 生 化分析 仪 操 作 步 骤 项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件 仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件 检验 结果的判断 与分析 质 量 控 制 ： 在 每 一 批 标 本 中 都 应 把 非 定 值 血 清 水 平 I 与 II 质 控 做 为 未 知 标 本 进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控 规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。 计算方法： 以罗氏复合校准品 ALT 校准值校准仪器后， 在病人结果可报告范 围内， 仪器直接报告可靠的检测结果， 以 U/L 报告。 参考值 范围 [4] 女 性 31U/L 男 性 41U/L 临床意义[1,2]:丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT）,天门冬氨 酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它们是氨基转移酶类的典型代表。 氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给 -酮酸的反应。 ALT 是肝脏的特异性酶，仅在 肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等 都有关。因此同时进行ALT和AST的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。 AST/ALT 比率用于肝病的鉴别诊断。 比率1 预示中度的肝损伤；比率1 和严重肝 病有关， 常见慢性肝病。 线性范围 4?800U/L 超出范围结果处理 本法对ALT活力检测的最大△ A/min在340、334nm为0.16, 在 365nm 为 0.08 。当样品测定值超过上限时，应将样品用