植物生理学实验：实验二 叶绿素a、b含量测定.pptVIP

Company Logo LOGO 实验原理 根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。 根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比， 即A＝αCL式中：α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，α为该物质的吸光系数。 实验原理 各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。 如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。 今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A，并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。 实验原理 叶绿素a、b在95%乙醇中最大吸收峰的波长分别为665nm和649nm，类胡萝卜素为470nm，可据此得出以下公式: 色素浓度计算公式（浓度单位：mg·L-1） Ca= 13.95A665 – 6.88A649 Cb= 24.96A649 – 7.32A665 CT = Ca+ Cb = 18.08A649 + 6.63A665 Cx.C=（1000A470 –2.05Ca – 114.8 Cb）/245 实验