《DNA的粗提取与鉴定》教案.docxVIP

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  • 2020-12-06 发布于山东
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DNA的粗提取与鉴定 教材内容解读 要点 1 提取 DNA的方法 1)分离 选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 2) DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同, DNA在 NaCl 溶液中的 溶解度随 NaCl 的浓度变化, 在 0.14mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低。 选择适当的盐溶液就 能使 DNA充分溶解,而使杂质沉淀,在 0.14mol/L 的 NaCl 溶液中 DNA会析出。 DNA不溶于酒精溶液, 但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。 利用这一原理, 可以将 DNA 与蛋白质进一步分离。 ( 3) DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质,但是对 DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受 60~ 80℃的高温, 而 DNA在 80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对 DNA没有影响。 ( 4) DNA的鉴定 在沸水浴的条件下, DNA遇二苯胺会被染成蓝色。二苯胺可以作为鉴定 DNA的试剂。 要点 2 实验设计 ( 1)实验材料的选取 选用 DNA含量相对较高的生物组织,如鸡血。 ( 2)破碎细胞,获取含 DNA的滤液 动物细胞以鸡血为例, 在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水, 同时用玻璃棒搅拌, 过滤后收集滤液即可。 植物细胞需要先用洗涤剂溶解细胞膜。 3)去除滤液中的杂质方

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