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2014-9-3 疟疾培训 1 疟疾项目培训 -- 血片制作技术 赤水市疾病预防控制中心 李桂华 寄生病医师 2014 年 9 月 3 日 2014-9-3 疟疾培训 2 血检的意义 ? 血涂片显微镜检查疟原虫,是疟疾 诊断和虫种鉴别的主要方法。发热 病人血涂片显微镜检查(简称“发 热病人血检”),是目前疟疾控制 和监测的重要手段。 2014-9-3 疟疾培训 3 血检的对象: ? 市医疗卫生单位要做好“三热”病 人(临床诊断疟疾、疑似疟疾、不 明发热病人)的血检工作; ? 各乡镇卫生院要做好“四热”病人 (疟疾症状、疑似疟疾、疑似感冒、 原因不明的发热)的血检工作。 2014-9-3 疟疾培训 4 血片制作染色与疟原虫计数 血膜的制作 用于检查疟原虫的血涂片有两种:一种 是将血液涂呈薄膜状,称 薄 血膜 ;一种 是血液涂成圆盘,称 厚血膜 。薄血膜上 的血细胞要求平辅在玻片上面。 发热病人血片 标本片 2014-9-3 疟疾培训 5 血膜的制作(取血时间) ? 取血时机 现症病人一般可随时取血,疟疾普查时 可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期疟原虫作 标本时,则应掌握适宜的取血时机。 间日疟在寒热发作时,外周血液中主要可见环状体 期;发作后数小时,环状体发育到滋养体期,疟色 素 形 成 , 形 态 较 易 辩 认 , 为 诊 断 的 有 利 时 机 ; 36~48 小时,可检出裂殖体;发作一、二次后, 配子体出现较多。 ? 恶性疟较理想的取血时间是在发作后至 20 小时内取 血,初发患者退热后常查不到原虫。 2014-9-3 疟疾培训 6 血膜的制作(取血操作) ? 取血方法 采血部位一般人为耳垂,指头, 通常在耳垂取血(现场取血建议用大头针 采血,一人一针,避免血传疾病)。先用 75% 酒精棉球消毒取血部位(冬季用手 捻动耳垂使其充血后再行消毒),待酒精 干后,用左手拇指和食指紧捏耳垂上方, 右手持消毒针迅速刺入耳垂下端 1~2 毫米, 不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻向 挤压出血。 2014-9-3 疟疾培训 7 取血量及涂片法(涂片操作) ? 薄血膜 取洁净的载玻片 2 张, 1 张平置在桌上,以左手拇 指 , 食 指 夹 持 载 玻 片 两 端 (手指切勿接触玻片表面), 用另一张边缘平滑(最好为 磨口边缘)的载玻片做推片, 用推片一端边缘的中点从取 血 部 分 取 约 1 微 升 的 血 量 (相当于 1/4 火柴头大小), 使血滴与平置的载玻片接触, 并形成 25~30 度夹角,待 血液向两侧扩展约 2 厘米长 度时,均匀而迅速地轻轻向 左推出(约 2.5 厘米长)。 2014-9-3 疟疾培训 8 (涂片操作) 厚血膜 用推片的一角,从取血部位刮取约 4 微升血 量(相当于火柴头大小),使血滴与平置的载玻片 接触,再由里向外一个方向旋转,转 2~4 圈,涂成 直径 0.8~1 厘米大小圆形厚血膜,血膜厚薄均匀, 过厚易于脱落,过薄达不到检出率的要求。 2014-9-3 疟疾培训 9 血膜的制作 (涂片操作) ? 涂制厚、薄血膜的位置 通常是将厚、薄血膜 涂在一张载片上。方法是将载片分为 6 等分, 第 1 、 2 格备贴标签及编号用;厚血膜涂在第 3 格中央,薄血膜涂在第 4 格前缘至第 6 格中部。 作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各 1 个 ; 门诊和发热病人血片每片 1 人,涂 涂 2 个厚血膜 1 个薄血膜, 以 防血膜脱落而影响检查 ; 疟疾调查时,每张玻片 可涂制 2~3 人血膜。 标本片 发热病人血片 标签 标签 2014-9-3 疟疾培训 10 血膜的制作 ? 血膜编号 血膜制成后,立即用特种 蜡笔或水笔于玻片面上写上受检者的 号码,以防差错,待薄血膜干后再用 铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号 和受检者的个人编号,依次顺序插入 标本盒内。 2014-9-3 疟疾培训 11 制作 血膜 的注意事项 1 . 玻片清洗时,避免玻片碰撞、 磨损。制作血膜的载玻片必须完 全清洁而毫无油渍或污垢。制片 时,手指只能持载片的边缘,不 能接触玻片表面,以免油污使薄 血膜产生空白区以及厚血膜脱落。 作为推片的玻片边缘一定要平滑, 才能使推出的血膜均匀一致。 2014-9-3 疟疾培训 12 制作 血膜 的注意事项 ? 2 . 刚涂制的血膜要平放在标本盒内,厚血膜 未干前勿使标本盒倾斜,以免血膜倾向一侧, 造成血膜厚薄不均,厚处不一溶血和着色而影 响检查结果;晾干血膜时应注意防尘、防止苍 蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜,干后应及时装入标 本盒并盖严,新的木制标本盒需敞开放置一段 时间,让木醇挥发后才能使用,以免厚血膜红 蛋白被其固定,不能溶血或染色效果不佳。 2014-9-3 疟疾培训 13 制作 血膜 的注意事项
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