2020蛋白质相互作用.pptVIP

B A x Y 细胞裂解 蛋白质 X 的抗体 进行免疫沉淀 X Y Techniques ： 免疫共沉淀： 基于免疫共沉淀中非特异性的实验设计考虑 （类型 II ） 研究方案 : Affinity purification MS 带 Tag 的目标蛋白与固相基质偶联 目标蛋白带上 Tag 目标蛋白相互作用蛋白的亲和纯化 目标蛋白复合物的 SDS分离 蛋白质条带的切割和酶解 质谱与生物信息学分析 文献与其他数据库的功能分析 实验验证与功能的探索 MTSS1 过量表达促进 PDGF 诱导的背部变皱膜形成 GFP MTSS1-GFP F-actin F-actin GFP GFP 研究方案 : Co-immunoprecipitation MS Serum starvation MIM-GFP infected NIH 3T3 cell PDGF stimulation Crosslinker stabilize complex Immunoprecipitation with GFP antibody SDSExcise bands and digestion Analyze by MS and bioinformatics ? 核糖体蛋白 ? 代谢酶类