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圆二色谱仪使用手册 实验前请先阅读第一部分注意事项 20RR年4月6日整编 河北大学理化中心 目录 一、 注意事项 二、 光源的选择 三、 MOS450波长的校正 四、 电压的调节 五、 MOS-450圆二色光谱扫描操作规程 六、 MOS450-SFM300动力学操作方法 一、注意事项 1、 滴定及变温实验时，需要磁子搅拌。实验结束时首先拔掉搅拌电源。在样 品池内无磁子的情况下搅拌器空转会烧毁控温元件。 2、 光源（也就是氙灯或汞氙灯）不可频繁开关。举例而言，如果马上不用仪器， 但半个小时后需要使用仪器，就不要为了节约光源寿命而将光源关闭。短时间内 频繁开关光源反而会缩短光源寿命。 3、 光电倍增管移动时（比如从圆二色模式换为荧光模式），注意用软件将Hv （高 压）关闭。 Specliometei El 50D nm Eir | 0 nm ShultP | HV” | Ai±o| 1 — V Yoltmclcr L mV 1 U HUZ Vnlt 1 1 3 * ■ 1 4、 扫描速度在0.5-5s/nm。使用手册上写的扫描速度有误，特别注意不要低于 0.5秒/nm,过快的扫描速度易造成calibration移位。 5、 如需用到emission单色器，就是那个需要用光纤连接的单色器，扫描速度 要大于1s/nm连0.5s/nm都不能用。 6、 PMT的HV不要超过1000V. 7、 使用控温附件进行变温实验时，一定要将地上的那个水浴恒温槽打开，水 槽温度设为20度以下即可。 8、 TCU 上设置为 remote;PowersupplR设置为 ARC. 9、 仪器运行过程中，更换样品时，shutter最好关闭。 二、光源的选择 1电源: 图1中的LamppowersuppIR处有Re （红色）、Re（Hg）（红色）、零线（黑色） 三个插孔。 零线插头为黑色，直接插到黑色的零线插孔中。 火线插头为红色，在做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时插在 Re （红色）插孔中， 在做快速动力学测量的时候插在 Re（Hg）插孔中。 2、光源选择： 图2中的Verticalsetting部位下方的底座上有 Re、Re（Hg）两个标示前后排列。 手动松开中间的大圆头 Screws（图2中），可以拉出或推进 Verticalsetting。当 Verticalsetting的金属头通过前后移动到下方的哪个标示位置上，也就是那个标示 所示的灯正对着光路，为测试用光源。做快速动力学测量的时候选 Re（Hg），做圆 二色、紫外、荧光的光谱扫描时选 Re,最后再旋紧中间的大圆头Screws。 注：Re（Hg）灯中的Hg元素有一些很强的特征谱线，加强了 Re元素发光的 强度，对于动力学测量要求一个波长的光源能量要强，才能测量较为精确的谱图。 而对于光谱扫描，单独的Re元素谱线较为平滑，光源对扫描的影响较小。 radiaiar to remwe - l^imp hiQ using Supply horizontal 图1图2 三、MOS450波长的校正 仪器使用一段时间后需要对仪器进行波长校正，以保证测量的准确性，波长 校正的操作步骤如下： 1、 确认样品仓中没有任何样品和样品池。 2、 根据光源选择的操作说明，将光源换为 Re（Hg）灯。 3、 打开 ALR-250、MM-450 和 PMS-450 电源。 4、 点击电脑中的BioKine软件图标，进入测量主界面。 5、 在主界面选择 Device菜单的Scanningspectromete命令，进入光谱扫描界面。 点击■■■■■;lor ：:， ■按钮设置参数，在光谱测量模式里选择 Fluoresce nee模式, 波长扫描范围200-750nm,进行光谱扫描，得出如图1所示谱图。此时检测器 位置为与入射光成180度的位置，不用改为荧光的位置。 6、 谱图在546nm处应该出一个峰，比较 546nm处的峰是否有偏差。如果超出 +/-1 nm的范围，需要进行波长校正。 7、 举例说明，如果在550nm处出峰，波长偏了 4nm,那么就在图2所示主界面左 下栏的ER处填入550nm,按回车键。 图2 8 点击图2主界面In stall菜单的Spectrometeradva ncedsett ing命令，出现图3所 示的窗口，点击ERcitation下方的Calibration按钮，进入波长校正界面，如图 4。 图3 图4 在图4所示窗口里的Currentwavelength处输入546,点击OK按钮，进行波长校正。 Re灯校准波长467nm； Re(Hg)灯校准波长546nm。 操作完以上各步骤，波长校正完成。可进行正常的测量操作。 四、电压的调节 选择Re灯，打开ALR-250稳定10分钟，将ALR-250