《基因工程及应用》ppt演示课件.pptxVIP

TAGTCC基因工程及其应用GGAATT本课聚焦:什么是基因工程? 基因工程的原理是什么?资料分析引入资料一：目前，全球的氮肥生产耗费世界总电力的3%-4%，且农作物只能吸收氮肥的1/10,造成了大面积土壤和水质的污染。豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮资料二：蛛丝是自然界最奇特的物质之一，它具有极强的韧度，其韧度是同样直径钢材的好几倍。但与家蚕不同，蜘蛛不能家养，因为它们会互相吞食，所以不可能建立人工饲养蜘蛛的农场。30多年来，科学家们一直试图找到利用其他生物体来制造蛛丝的办法。蜘蛛能够吐出蛛丝 资料三 以往，治疗糖尿病的胰岛素是从动物胰腺中提取的，从100千克猪、牛等动物的胰腺只能提取3－4克胰岛素，治疗一个患者需宰杀40－50头牛，这种药物的造价就可想而知了。 微生物可以有分泌产物，且微生物繁殖速率快能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？设想一设想二能否让细菌“吐出”蛛丝？能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？设想三经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。供体细胞受体细胞一、基因工程的定义基因工程：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。原 理：基因重组操作水平：DNA分子水平结 果：定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。目的基因获得新性状实例展示培育转基因大肠杆菌的简要过程：人体组织细胞含有胰岛素基因普通大肠杆菌(不能分泌胰岛素)提取与运载体DNA拼接导入胰岛素基因大肠杆菌(含胰岛素基因)你认为上述培育转基因大肠杆菌的关键步骤有哪些？转基因大肠杆菌(能分泌胰岛素)1.ONE2.TWO3.THREE胰岛素基因导入受体(大肠杆菌)细胞胰岛素基因从人体细胞内提取出来胰岛素基因与运载体DNA连接基因的“针线”基因的“剪刀”基因的运载体培育转基因大肠杆菌的关键步骤：二、基因操作的工具1.基因的“剪刀”──限制性内切酶（限制酶）　一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。专一性如:EcoRI限制酶点击播放限制性内切酶（EcoRⅠ）作用过程思考:　被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？基因操作(gene engineering)的工具2.分子针线—DNA连接酶 (DNA linking-enzyme)DNA连接酶连接的是两个脱氧核苷酸(deoxyribonucleotide)分子的什么部位？磷酸二酯键点击播放DNA连接酶的作用过程G A A T T CG A A T T CC T T A A GC T T A A GG 用同种限制酶切割G A A T T CC T T A A A A T T CC T T A A G GG A A T T CC T T A A G基因的针线：DNA连接酶DNA连接酶连接的是DNA骨架上的缺口，不是碱基间的氢键下列是由限制酶切割形成的DNA片段，能用相应DNA连接酶将它们恢复连接的组合是④ AATTC…③ G…①…CTGCA …G②…G G……CTTAAACGTC…A. ①③；②④ B. ①②；③④C. ①④；②③ D.以上都不对ADNA连接酶的作用是：CA.子链和母链之间形成氢键B.黏性末端之间形成氢键C.两个DNA末端间的缝隙连接D.A、B、C都对 基因操作(gene engineering)的工具3.基因的运输工具——运载体 (carrying)常用的运载体(carrying)有两类： 1）细菌细胞质的质粒( plasmid) 2）噬菌体(bacteriophages)　或某些动植物病毒 (virus)目的基因(如人的胰岛素基因)怎样才能导入受体细胞(如大肠杆菌细胞)？——运载体 常用的运载体： 质粒、噬菌体和动植物病毒等 质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.　标记基因，便于进行检测。大肠杆菌的质粒 (plasmid)：？运载体(carrying)1能够在宿主细胞内复制并稳定保存；２具有多个限制酶切点以便与外源基因相连；３具有标记基因，便于进行筛选．运载体(carrying)应该具有什么特点呢?导入扩增三、基因工程基本步骤1、获取目的基因2、目的基因与运载体结合　用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在DNA连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。3、将目的基因导入受体细胞(常用的受体细胞：菌类和动植物细胞)4、目的基因的表达和检测有表达产物无表