常用抗凝剂的配制及用法.docxVIP

在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗 凝。对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。 一、肝素 （1）肝素抗凝作用原理 肝素的抗凝作用很强 , 作死亡复苏等实验时 , 常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作 用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液 不发生凝固。 （2）配制和用量 纯的肝素 10mg能抗凝 65~125 ml 血液 ( 按 lmg 等于 125U，10~20U能抗 1 ml 血液计 ) 。 但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。一般可 配成 1％肝素生理盐溶液，用时取 0．1 毫升于试管内， 100℃烘干，每管能抗凝 5～10ml 血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。 在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠 2．5～3．0mg/200～300g 体质量，兔 10m g／kg 体质量，狗 5～ 10mg／ kg 体质量。肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离 蛋白质作蛋白质各部分的测定时， 不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素 12500U， 相当于 100mg。 二、草酸盐合剂 （1）原理 草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按 3： 比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。 （2）配制方法及用量 草酸铵 1．2g、草酸钾 0．8g、福尔马林 1．0ml、蒸馏水加至 100ml 每毫升血加草酸盐 合剂 0．1ml( 即相当草酸铵 1．2mg，草酸钾 0．8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量 加入玻璃容器内烤干备用。如取 0．5ml 于试管，烘干后每管可使 5ml 血不凝固。 （3）注意事项 草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。用时注意加 的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定， 也不能用于血液非蛋白氮测定。 三、枸橼酸钠 常配成 3～5%水溶液。也可直接加粉剂，每毫升血加 3～5mg，即可达到抗凝目的。 枸橼酸钠可使钙失去活性，防止凝血。但其抗凝作用较差，碱性较强，不宜作化学检 验之用。仅可用于红细胞沉降速度测定。急性血压测定实验所用枸橼酸钠为 5～6％溶液。 四、草酸钾 （一）原理和注意事项 草酸钾为最常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合，形成不溶 解的草酸钙，使血液不凝固。常用于非蛋白氮测定，但不适用于测定钾和钙。草酸盐能抑 制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性，故应注意。 （二）配制及使用方法 取草酸钾 10g，加蒸馏水少许使溶解，再加蒸馏水至 100ml。配制成 10％水溶液，如每 管加 0.1ml 则可使 5~10ml 血不凝。一般如作微量检验，用血量较少，可配制成 2％溶液， 如每管加 0．1ml 可使 1~2ml 血液不凝。 五、乙二胺四乙酸二钠盐（ EDTA） EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力，能与钙离子络合而使血液抗凝。每 0.8mg 可抗 凝 1ml 血液。除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外，适用于多种抗凝