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- 2021-01-03 发布于云南
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-1- 第十三单元 现代生物科技专题 第1讲 基因工程 * 知识突破 真题感悟 考向突破 必记必辨通关 1.基因工程的概念 (1)供体:提供____________的生物体。 (2)操作环境:_________。 (3)操作水平:_________水平。 (4)原理:____________。 (5)受体:表达目的基因。 (6)本质:性状在________体内的表达。 (7)优点:克服__________________的障碍,定向改造生物的__________________。 2.DNA重组技术的基本工具 (1)限制性核酸内切酶(简称:________) ①来源:主要是从__________生物中分离纯化出来的。 ②作用:识别特定的____________,并切开特定部位的两个核苷酸之间的_______________。 ③结果:产生___________或平末端。 目的基因 体外 分子 基因重组 受体 远缘杂交不亲和 遗传性状 限制酶 原核 核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 * 知识突破 真题感悟 考向突破 必记必辨通关 (2)DNA连接酶 ①种类:按来源可分为E·coli DNA连接酶和__________________。 ②作用:将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的__________。 ③DNA连接酶和限制酶的关系 (3)载体 ①种类:______、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 ②质粒的特点 标记基因 T4DNA连接酶 磷酸二酯键 质粒 限制酶切割位点 * 知识突破 真题感悟 考向突破 必记必辨通关 【教材深挖】 1.用限制酶切割时需注意哪些问题? 2.下图中的图1和图2分别表示的是EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的作用示意图。请据图回答问题。 (1)请说出EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶识别的碱基序列及切割的位点。 (2)以上实例说明限制酶有何特性? 1.①获取目的基因和切割载体时,经常使用同一种限制酶(也可使用能切出相同末端的不同限制酶),目的是产生相同的黏性末端或平末端。②获取一个目的基因需限制酶切割两次,共产生4个黏性末端或平末端。③限制酶切割位点的选择,必须保证标记基因的完整性,以便于检测。 2.(1)EcoRⅠ限制酶识别的碱基序列是GAATTC,切割位点在G和A之间;SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是CCCGGG,切割位点在G和C之间。 (2)说明限制酶具有专一性。 * 知识突破 真题感悟 考向突破 必记必辨通关 1.(2017四川重庆秀山中学月考,1)如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( ) A.①②③④ B.①②④③ C.①④②③ D.①④③② 【解析】限制酶可在特定位点对DNA分子进行切割;DNA聚合酶在DNA分子复制时将脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸链;DNA连接酶可将双链的DNA片段“缝合”在一起;解旋酶的作用是将DNA双链解开螺旋,为复制或转录提供模板。 C * 知识突破 真题感悟 考向突破 必记必辨通关 2.根据基因工程的有关知识,回答下列问题。 (1)限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有________和________。 (2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下: 为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoR Ⅰ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是_________________________________________________________________。 (3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即________DNA连接酶和________DNA连接酶。 (4)逆转录作用的模板是____________,产物是____________。若要在体外获得大量逆转录产物,常采用________技术。 (5)基因工程中除质粒外,______________和________________________________也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是_________________________________________________________________。 未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱(其他合理答案也可) 黏性末端 平末端 切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同(其他合理答案也可) E·coli T4 mRNA(或RNA) cDNA(或DNA) PCR λ噬菌体的衍生物 动植物病毒(其他合理答案也可) *
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