(生物科技行业)第二章微生物实验室常用试剂、培养基.docxVIP

微生物实验室常用试剂培养基多年的企业咨询顾问经验「经过实战验证可以落地执｛我卓越管涅方案，值得您下载拥育（生物科技行业）第管方案 微生物实验室常用试剂 培养基 多年的企业咨询顾问经验「经过实战验证可以落地执｛我卓越管涅方案，值得您下载拥育 （生物科技行业）第 管 方案 微生物学实验室常用试剂与培养基 第一节常用试剂及其使用方法 一、诊断用纸片 ⑴杆菌肽纸片（0.04U/片）：抑 菌圈 10mm 为敏感。质控菌株 :D 群 链球菌阴性 ,A 群链球菌阳性。 ⑵SMZ 纸片（1.25卩g/片、23.75卩 g/ 片）：出现抑菌圈即为敏感。质控 菌株： D 群链球菌阳性， A 群链球菌 阴性。 ⑶新生霉素纸片（5.0卩g/片）：抑菌 圈》16mm 为敏感。质控菌株：表皮 葡萄球菌阳性，腐生葡萄球菌阴性。 ⑷0129 纸片、奥普托欣 （ Optochin ）纸片：参见第五节《生 化试验培养基》。 二、诊断用血清 沙门菌属诊断血清 ⑴ A-F 群 0 多价诊断血清。 ⑵特异 0 群因子诊断血清：常用 的有 02，04，07，09，010 诊断 血清。 ⑶特异 H 因子诊断血清常用的有 Ha，Hb ，Hc，Hd ，Hgm ，Hi， Hf 、 Vi 因子诊断血清。 志贺菌属诊断血清 志贺菌属 4 种多价血清：痢疾志 贺菌I、U血清，福氏志贺菌多价血 清及分型血清（1?6型），宋内志贺 菌诊断血清，鲍氏志贺菌多价血清及 分型血清。 致病性大肠埃希菌诊断血清 肠致病性大肠埃希菌（EPEC）诊 断 血 清 ， 产 肠 毒 素 大 肠 埃 希 菌 （ETEC）诊断血清，肠侵袭性大肠埃 希菌（EIEC）诊断血清，肠出血性大 肠埃希菌（EHEC）诊断血清 O157 : H7。 霍乱弧菌 O1 、O139 混合多 价诊断血清及稻叶、小川、彦岛 O139 分型 血清 脑膜炎奈瑟菌多价血清及分群 血清 链球菌分类诊断血清 肺炎链球菌诊断血清 耶尔森菌诊断血清 三、常用染色液 革兰染色液 ⑴结晶紫溶液 A 液： 结晶紫 20g ， 95%乙醇 20ml ；B 液：草酸铵 0.8g ，蒸馏水 80ml 。 染色前 24h 将 A 液、 B 液混合 , 过滤后装入试剂瓶内备用。 ⑵碘液:碘1g，碘化钾2g，蒸馏 水 300ml 。 将碘与碘化钾混合并研磨 ,加入几 毫升蒸馏水 ,使其逐渐溶解 ,然后研磨 , 继续加入少量蒸馏水至碘、碘化钾完 全溶解。最后补足水量。也可用少量 蒸馏水将碘化钾完全溶解 ,再加入碘片 , 待完全溶解后 ,加水至 300ml 。 ⑶脱色液： 95% 乙醇 ⑷复染液：沙黄2.5g，95%乙醇 100ml 为贮存液，取贮存液 10ml ， 加蒸馏水 90ml 为应用液。 抗酸染色液 ⑴碱性复红染色液：①萋纳石炭 酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和溶液 10ml ， 5%石炭酸溶液 90ml 。②脱色 液：浓盐酸 3ml ， 95% 乙醇 97ml 。 ③复染液 （吕弗勒美蓝液 ）：美蓝乙醇 饱和溶液 30ml ，100g/L 氢氧化钾溶 液 0.1ml ，蒸馏水 100ml 。 ⑵金胺0-罗丹明B染色液：① 罗丹明 B 液：罗丹明 B0.1g 加蒸馏水 100ml 。② 1g/L 金胺 0 液：金胺 0 液 0.1g 加蒸馏水 95ml, 再加入纯石炭 酸5ml,混匀。③3%盐酸乙醇。④稀 释美蓝液：吕弗勒美蓝液 100ml, 加蒸 馏水 90ml, 混匀。 第二节 一、液体基础培养基 蛋白胨水 ［用途］ 用于细菌靛基质试验；一般细菌 培养和传代。 ［配法］ 蛋白胨（或胰蛋白胨） 10g ，氯化钠 5g ，蒸馏水 1L。 将上述成分溶于水中，校正 pH 至 7.2, 分装试管，每管 2~3ml ，置 121 °C灭菌15min备用。 ［质量控制］ 大肠埃希菌生长良好，靛基质阳 性；伤寒沙门菌生长良好，靛基质阴 鞭毛染色液 （改良 Ryu 法 ） A 液： 5% 石炭酸 10ml ，鞣酸 2g ，饱和硫酸 铝钾溶液 10ml ；B 液：结晶紫乙醇饱和液。应用液 A 液 10份,B液1份混合，室温存放备用。 异染颗粒染色液 甲液：甲苯胺蓝 0.15g ，孔雀绿 2g/L ， 95% 乙 醇 2.0ml ， 蒸 馏 水 100ml 。乙液：碘 2g ，碘化钾 3g ， 蒸馏水 300ml 。 先将碘化钾加入少许蒸馏水 （ 约 2ml）, 充分振摇 ,待完全溶解 ,再加入碘 , 使完全溶解后 ,加蒸馏水至 300ml 。 荚膜染色液 ⑴印度墨汁或 50g/L 黑色素水溶 液 ⑵ 5g/L 苯胺蓝水溶液。 基础培养基 性。 营养肉汤 ［用途］ 一般细菌的增菌培养，加入 1% 的琼脂粉亦可作营养琼脂。 ［配法］ 蛋白胨 10g ，牛肉膏 3g ，氯化钠 5g