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IFN-τ 对奶牛子宫内膜损伤的保护作用及机制研究 目录 摘要 i Abstract iv 缩略语表vii 缩略语表（续表）viii 第一章 文献综述 1 1 IFN-τ 及其生物学作用 1 1.1 IFN-τ 的发现 1 1.2 IFN-τ 与妊娠识别 2 1.3 IFN-τ 的其他作用 3 1.4 I 型干扰素信号转导通路 3 2 奶牛子宫内膜炎 4 2.1 子宫内膜炎及其危害 4 2.2 子宫内膜炎发病机制 5 2.3 子宫内膜的天然免疫反应 6 2.3.1 依赖MyD88 的信号通路 7 2.3.2 不依赖MyD88 的信号通路 8 3 MicroRNA （miRNA ）及其生物学作用 9 3.1 miRNA 的发现 10 3.2 miRNA 的生物合成及其作用机制 10 3.3 miRNA 与炎性免疫应答 12 4 PI3K/AKT 与Wnt/β-catenin 信号通路 15 4.1 PI3K/AKT 通路及其生物学作用 15 4.2 Wnt/β-catenin 通路及其生物学作用 16 5 研究目的与意义 17 第二章 IFN-τ 对奶牛子宫内膜上皮细胞炎性损伤的保护作用 18 1 引言 18 2 材料与方法 19 2.1 试验材料 19 I 华中农业大学2020 届博士研究生学位（毕业）论文 2.1.1 主要仪器设备 19 2.1.2 主要试剂与药品 19 2.1.3 主要溶液的配制 20 2.2 试验方法 21 2.2.1 原代奶牛子宫内膜上皮细胞培养 21 2.2.2 免疫荧光染色技术 22 2.2.3 细胞增殖检测 22 2.2.4 细胞凋亡检测 23 2.2.5 细胞周期检测 23 2.2.6 RT-qPCR 技术 24 2.2.7 Western blot 技术 26 2.3 试验数据统计与分析 27 3 试验结果 28 3.1 原代子宫内膜上皮细胞的培养和鉴定 28 3.2 子宫内膜上皮细胞炎性损伤模型的构建 28 3.3 IFN-τ 作用浓度的筛选及对细胞损伤的保护作用 29 3.4 IFN-τ 抑制细胞炎症和凋亡反应相关蛋白的表达 31 4 讨论 32 第三章IFN-τ 对PI3K/AKT 信号通路的调节作用 34 1 前言 34 2 材料与方法 35 2.1 试验材料 35 2.1.1 主要仪器设备 35 2.1.2 主要试剂与药品 35 2.1.3 主要溶液的配制 36 2.2 试验方法 36 2.2.1 原代奶牛子宫内膜上皮细胞培养 36 2.2.2 奶牛子宫内膜上皮细胞的分组处理 36 II IFN-τ 对奶牛子宫内膜损伤的保护作用及机制研究 2.2.3 细胞转染试验 36 2.2.4 小鼠子宫内膜损伤模型的构建 36 2.2.5 流式细胞术试验 37 2.2.6 RT-qPCR 技术 37 2.2.