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微生物检测技术和相关仪器
首页 → 第八章 微生物检测技术和相关仪器
自动血培养仪进展
血培养检验是用于检验血液样品中有没有细菌存在一个微生物学检验方法,对于快速检测临床上严重危及患者生命败血症、菌血症患者血液中是否有细菌生长以明确诊疗有十分关键作用,是临床有效诊疗关键。多年来,伴随科学技术进步和微生物学发展,微生物学家、计算机教授和工程技术人员相结合,已经发明出很多自动化、电脑化智能型自动血培养仪。
一、自动血培养仪基础结构和检测原理
自动血培养仪包含培养系统或恒温孵育系统、检测系统、计算机及外围设备。培养系统设有恒温装置和震荡培养装置,其中培养瓶支架依据容量不一样分为50瓶、120瓶、240瓶等。自动血培养仪依据各自检测原理设有对应检测系统。计算机及外围设备用于判定发出阴性、阳性结果汇报,统计和打印结果,进行数据储存和分析等。自动血培养仪检测原理关键有二氧化碳感受器、荧光检测和放射性标识物质检测三种检测技术。出于对环境保护和安全性方面考虑放射性标识物质检测已较少使用。美国BD企业BACTEC系列自动血培养仪荧光增强检测技术原理是细菌在代谢过程中利用培养基内营养成份,释放出二氧化碳,二氧化碳和培养瓶底部含有荧光染料感应器反应,使感应器内结合二氧化碳荧光物质被激发出荧光,系统每10min自动测定一次荧光水平,24h连续进行,经过电脑数据系统处理得出培养结果,并立即以声、光信号报警。法国bioMerieux企业VITAL自动血培养仪检测原理是在液体培养瓶内含有发荧光物质分子,在孵育过程中,如有细菌生长,其代谢过程中会产生氢离子、电子和多种带电荷原子团,发荧光分子接收了这些物质后改变本身结构转变为不发光化合物,出现荧光衰减现象,一旦被测出,即提醒有细菌生长。荷兰Organon Teknika企业BacT/alert自动血培养仪检测原理是在血培养瓶底部有一个固相感应器,感应器上有半渗透性薄膜将培养基和感应装置隔离,只有二氧化碳能经过薄膜。当培养瓶内有细菌生长,其释放二氧化碳可渗透至感应器,经水饱和后,产生氢离子,使pH值发生改变,感应器颜色也随之改变,颜色由原来绿色变成黄色,这一过程由一个置于检测组件内部光反射检测计进行连续监测。
二、自动血培养仪性能特点
和自动血培养仪配套培养瓶是血培养仪关键关键技术,设置不一样培养瓶目标关键是针对微生物对营养和气体环境要求悬殊,患者年纪和体质差异较大及培养前是否使用抗生素三大要素,不仅提供不一样细菌繁殖所必需增菌液体培养基,还包含适宜气体成份,最大程度检出全部阳性标本,预防假阴性。现在常见培养瓶种类通常有标准需氧培养瓶、标准厌氧培养瓶、树脂或活性炭需氧培养瓶、树脂厌氧培养瓶、树脂儿童培养瓶等。标准培养瓶用于未使用抗菌素患者,经济实用,节省成本,适合多种细菌和酵母菌生长;树脂培养瓶适合已使用抗菌素患者标本,树脂包含亲水树脂和疏水树脂两种剂型,可分离已和细菌结合抗菌素,裂解红细胞释放养分供细菌使用,裂解白细胞释放已被吞噬细菌,断开链球菌及葡萄球菌簇以加速细菌生长,能够吸附临床使用绝大多数抗菌素,使这类标本临床阳性培养率提升1/3;儿童培养瓶专门为儿童设计,添加特殊促进细菌生长因子,并含树脂,可提升血培养阳性率。自动血培养仪检测速度快、正确性及敏感性高是血培养仪突出特点。如依据1994年美国微生物协会年会汇报美国BD企业BACTEC9050自动血培仪平均阳性标本检出时间为9.65h,最快阳性汇报时间为30min,培养20h阳性标本检出率为88.9%,培养48h阳性标本检出率为95%。法国bioMerieux企业miniVITAL自动荧光血培养仪灵敏度为1000CFU/L。培养瓶采取真空负压采血技术,不需使用注射器采血,降低了成本,并降低标本污染机会;采血时血流量均匀,使病人免受痛苦;血量采集正确,避免血量过多或过少而影响检测结果正确性;采血密闭性操作,提升了医护人员安全性。培养瓶使用期长达1年,储藏温度范围2℃~30℃;需氧培养瓶已预先填充培养所需气体,无须再做通气操作,提升了检验人员安全性,降低了成本,降低了污染;培养瓶采取双条形码技术,撕下1条粘贴在病人汇报单上,查询病人结果时,只需用电脑上条码阅读器扫描一下汇报单上条码,就可直接查询到病人结果及生长曲线。通常血液培养仪不仅可进行血液标本检测,也能够用于临床上全部没有菌体液细菌培养检测,如胸水、腹水、脑脊液、骨髓、关节液、腹透液、膀胱穿刺液、心包积液等。
三、自动血培养仪发展趋势
自动血培养仪发展经历了观察指标从肉眼到放射性标识、再到非放射性标识,操作从手工到半自动、再到自动,结果判定从终点到连续判读、能统计细菌生长曲线、一旦出现阳性结果可随时汇报多个阶段。以后自动血培养仪发展趋势包含要求作到以下多个方面:检出范围更广,阳性率更高
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