小鼠DDX18对IFN-β产生和病毒增殖的影响.pdfVIP

下载本文档

59
0
约13.83万字
约 70页
2021-01-11 发布于江苏
举报
版权申诉

小鼠DDX18对IFN-β产生和病毒增殖的影响.pdf

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

小鼠DDX 18 对IFN-β 产生和病毒增殖的影响目录摘要i Abstract iii 缩略语表（Abbreviation ）vi 第1 章文献综述 1 1.1 DExD/H-box 家族蛋白概述 1 1.2 DEAD-box 家族蛋白参与天然免疫调控2 1.2.1 DEAD-box 家族蛋白正调控天然免疫3 1.2.2 DEAD-box 家族蛋白负调控天然免疫5 1.3 DEAD-box 家族蛋白影响病毒的增殖6 1.3.1 DDX1、DDX3 与DDX5 影响病毒的增殖6 1.3.2 其它DEAD-box 蛋白影响病毒的增殖8 1.4 基因敲除小鼠在DEAD-box 家族蛋白研究中的应用 10 1.4.1 基于基因编辑技术的基因敲除小鼠模型构建 10 1.4.2 DEAD-box 家族蛋白基因敲除小鼠的构建与应用 12 第2 章研究目的与意义 14 第3 章材料与方法 15 3.1 实验材料 15 3.1.1 细胞、毒株、菌株与动物 15 3.1.2 载体与质粒 15 3.1.3 工具酶、试剂盒、血清和主要化学试剂 16 3.1.4 Western blot 实验材料 17 3.1.5 培养基和抗生素的配制 17 3.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其配制 18 3.1.7 主要实验仪器及设备 19 3.1.8 动物实验所需的材料和试剂 19 3.1.9 分子生物学及序列分析软件20 3.2 实验方法20 3.2.1 细胞及动物组织总RNA 的提取20 3.2.2 cDNA 的合成及目的片段扩增20 3.2.3 限制性内切酶酶切反应22 3.2.4 PCR 产物或酶切产物的电泳检测22 3.2.5 PCR 产物或酶切产物的回收与纯化22 3.2.6 外源DNA 片段与质粒载体的连接反应22 3.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)22 3.2.8 连接产物的转化23 3.2.9 重组质粒的制备23 3.2.10 质粒的转染24 3.2.11 慢病毒的包装与检测24 I 华中农业大学2020 届硕士研究生学位论文 3.2.12 Real-time PCR 25 3.2.13 Western blot 25 3.2.14 siRNA 干扰实验 27 3.2.15 基因敲除小鼠的生产、繁育和检测 27 3.2.16 HSV-1、VSV 及VSV-GFP 病毒的增殖 29 3.2.17 病毒滴度的测定 29 3.2.18 小鼠攻毒实验与样品处理 30 3.2.19 MPM 细胞的分离 31 3.2.20 鼠源IFN-β ELISA 检测 31 3.2.21 统计学方法 32 第4 章结果与分析 33 4.1 干扰mDDX18 促进病毒诱导的IFN-β 产生 33 4.1.1 siRNA 干扰效果检测 33 4.1.2 干扰mDDX18 促进病毒诱导的IFN-β 产生 33