昆虫受体氨肽酶-N仿生聚合物纳米颗粒的设计及对Bt蛋白的选择性识别.pdfVIP

昆虫受体氨肽酶-N 仿生聚合物纳米颗粒的设计及对 Bt 蛋白的选择性识别 目录 摘要 i Abstract iii 缩略词表 vi 第一章 文献综述 1 1.1 Bt 蛋白 1 1.1.1 Bt 蛋白概述 1 1.1.2 Bt 蛋白的应用及环境生态风险 2 1.1.3 Bt 蛋白分析检测方法 3 1.1.4 Bt 蛋白杀虫机理 4 1.2 聚合物纳米颗粒 6 1.2.1 聚合物纳米颗粒研究概述 6 1.2.2 聚合物纳米颗粒应用现状 9 1.2.3 聚合物纳米颗粒合成方法及设计策略 10 1.3 聚合物纳米颗粒与生物大分子作用机理研究方法 12 1.3.1 等温滴定量热法(ITC) 13 1.3.2 单纳米颗粒表面等离子体共振成像(SPRI) 14 1.3.3 石英晶体微天平(QCM) 14 1.4 论文选题思想 15 第二章 实验材料及研究方法 17 2.1 实验所用药品及仪器 17 2.1.1 实验药品 17 2.1.2 主要溶液配制 17 2.1.3 实验仪器设备 18 2.2 聚合物纳米颗粒的制备 19 2.2.1 聚合物纳米颗粒的合成 19 2.2.2 大尺寸聚合物纳米颗粒的合成 20 2.2.3 聚合物纳米颗粒的纯化 21 I 华中农业大学 2020 届硕士研究生学位论文 2.3 聚合物纳米颗粒的性质表征 21 2.3.1 材料浓度及产率表征 21 2.3.2 材料粒径大小表征 22 2.3.3 pH 值对材料粒径的影响 22 2.3.4 材料表面 Zeta 电位表征 22 2.3.5 pH 值对材料表面 Zeta 电位影响 23 2.4 检测方法 23 2.4.1 蛋白质检测方法 23 2.4.2 多肽检测方法 25 2.5 聚合物纳米颗粒筛选及吸附条件优化 26 2.5.1 聚合物纳米颗粒吸附能力的筛选实验 26 2.5.2 缓冲液 pH 优化 27 2.5.3 缓冲液浓度优化 28 2.5.4 缓冲液盐浓度优化 28 2.6 聚合物纳米颗粒吸附性能的评价 28 2.6.1 选择性吸附实验 28 2.6.2 等温吸附实验 29 2.6.3 吸附动力学实验 29 2.7 Bt 蛋白潜在作用位点分析 30 2.7.1 酶解方法 30 2.7.2 Bt Cry1F 胃蛋白酶酶解液的吸附 30 2.7.3 Bt Cry1Ac 抗原决定簇及突变多肽的吸附 31 第三章 结果与讨论 32 3.1 丙烯酸-HP-7-NH2 单体的结构表征 32 3.2 聚合物纳米颗粒理化性质的表征 34 3.2.1 聚合物纳米颗粒浓度、产率及粒径的表征 34 3.2.2 pH 值对聚合物纳米颗粒粒径的影响 35