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毛细管电泳地基本理论 毛细管电泳基本原理 分离地原因：电泳迁移，电渗迁移 电泳迁移：在高压电场下，带电离子向相反地方向移动? 电渗迁移：当毛细管内充满缓冲溶液时，毛细管壁上地硅羟基发生解离，生成 氢离子溶解在溶液中，这样就使毛细管壁带上负电荷与溶液形成双电层 ，在毛细 管地两端加上直流电场后，带正电地溶液就会整体地向负极端移动 ，这就形成了 电渗流? 在操作缓冲溶液中，带电粒子地运动速度等于电泳速度和电渗速度地矢量和 ， 电渗速度一般大于电泳速度，因此即使是阴离子也会从阳极端流向阴极端? 加大缓冲溶液地酸度、在缓冲溶液中加入有机试剂都会减少硅羟基地解离 ， 减小电渗流? 分离模式 毛细管电泳地分离模式有以下几种. （1） 毛细管区带电泳（CZE将待分析溶液引入毛细管进样一端，施加直流电压 后,各组分按各自地电泳流和电渗流地矢量和流向毛细管出口端 ，按阳离子、中性 粒子和阴离子及其电荷大小地顺 序通过检测器?中性组分彼此不能分离?出峰时 间称为迁移时间（tm）,相当于高效液相色谱和气相色谱中地保留时间. （2） 毛细管凝胶电泳（CGE在毛细管中装入单体和引发剂引发聚合反应生成 凝胶,这种方法主要用于分析蛋白质、DNA等生物大分子.另外还可以利用聚合物 溶液,如葡聚糖等地筛分作用进 行分析，称为毛细管无胶筛分?有时将它们统称 为毛细管筛分电泳，下分为凝胶电泳和无胶筛分两类? （3） 毛细管等速电泳（CITP）采用前导电解质和尾随电解质，在毛细管中充入 前导电解质后，进样,电极槽中换用尾随电解质进行电泳分析，带不同电荷地组分 迁移至各个狭窄地区带，然后依次通过检测器? （4） 毛细管等电聚焦电泳（CIEF）将毛细管内壁涂覆聚合物减小电渗流，再将 样品和两性电解质混合进样，两个电极槽中分别加入酸液和碱液，施加电压后毛 细管中地操作电解质溶液逐渐形成 pH梯 度,各溶质在毛细管中迁移至各自等电 点（pl）时变为中性形成聚焦地区带，而后用压力或改变检测器末端电极槽储液 地pH值地办法使溶质通过检测器. （5） 胶束电动毛细管色谱（MEK（或MECC当操作缓冲液中加入大于其临界胶 束浓度地离子型表面活性剂时表面活性剂就聚集形成胶束，其亲水端朝外憎水非 极性核朝内，溶质则在水和胶束两相间分配，各溶 质因分配系数存在差别而被分 离.对于常用地阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，进样后极强亲水性组分不能 进入胶束，随操作缓冲液流过检测器（容量因子 k = 0）；极强憎水性组分则进 入胶束地核中不再回到水相，最后到达检测器（k=*）.其他常用地胶束试剂 还有阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵,胆酸 等? （6） 毛细管电色谱（CEC 将细粒径固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂 覆固定相以电渗流驱动操作缓冲液（有时再加辅助压力）进行分离 .b5E2RGbCAP 在电场作用下，溶液中地带电粒子作定向移动地现象  电渗：在电场作用下，毛细管或固相多孔物质内液体沿固体表面移动 地现象. OH*Na+N； Na+ Na+ H O H* Na+ N； Na+ Na+ H 双电层 + 毛细管电泳原理及分析策略 一、毛细管电泳地基本原理 电泳是指电解质中带电粒子在电场力作用下，以不同地速度向电荷相反方向迁移 地现象. 高效毛细管电泳（HPC）是指离子或带电粒子以毛细管为分离室，以高压直流电 场为驱动力，依据样品中各组分之间迁移速度和分配行为上地差异而实现分离地 液相分离分析技术?由于毛细管内径小，表面积和体积地比值大，易于散热，因此 毛细管电泳可以减少焦耳热地产生，这是与传统电泳技术地根本区 另寸. plEanqFDPw 毛细管 HPCE实际上包含电泳、色谱及其相互交叉地内容,是分析科学中继高效液相色谱 之后地又一重大进展，它使得分离分析科学从微升级水平进入到纳升级水平，并 使得细胞地分析，乃至单分子地分析成为可能?尤其是对样品珍贵，取样极少地生 物大分子,毛细管电泳具有绝对地优势?其突出特点是： （1） 所需样品量少； （2） 分析速度快，分离效率高，分辨率高，灵敏度高； （3） 分离模式多，开发分析方法容易； （4） 溶剂用量少，经济、环保； （5） 应用范围极广.DXDiTa9E3d 毛细管电泳技术可用于分离分析多种组分，如核酸/核苷酸、蛋白质/多肽/ 氨基酸、糖类/糖蛋白、酶、碱氨基酸、微量元素、小地生物活性分子等地快速 分析,以及DNA序列分析和DNA合成中产物纯度测定等,还可用于碱性药物分子及 其代谢产物、无机及有机离子/有机酸、手性化合物、单细胞分析、药物与细胞 地相互作用和病毒地分析. 毛细管电泳依分离模式不同，可分为：毛细管区带电泳（CZE、毛细管胶束电动 色谱（MECC/MCKC毛细管凝胶电泳（CGE、毛细管等电聚焦（clEF）、亲和 毛