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卵双胎或多胎的技术[可看作是动物无性繁殖或克隆
]注:目前仍以二分胚的移植效率最高。
熟读胚胎工程的基础知识 2012.4.12
(一)动物胚胎发育的基本过程
1精子的发生:补充,精原细胞先进行 有丝分裂增值 后进行减数分裂;变形过程中,细胞
核为精子头的主要部分,高尔基体发育为顶体,中心体演变为精子的尾,线粒体在尾基部形 成线粒体鞘膜,其他物质浓缩为原生质滴直至脱落。 [线粒体为精子运动提供能量]
2?卵子的发生:在胎儿时期,卵原细胞进行有丝分裂演变成初级卵母细胞 [被卵泡细胞包围],
减数分裂第一次分裂在排卵前后完成,形成次级卵母细胞和第一极体进入 输卵管准备受精;
减数分裂第二次分裂是在 受精过程中完成 的。
3?受精:受精场所是母体的输卵管。 (1)精子获能(在 雌性动物生殖道内);
(2) 卵子的准备(排出的卵子要在 输卵管中进一步成熟到减数第二次中期才具备受精能力);
(3) 受精阶段:[卵子周围的结构由外到内: 放射冠、透明带、卵黄膜 ],
a顶体反应:精、卵相遇时, 精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质,穿越放射冠。然后
精子接触透明带,顶体酶可将透明带溶出孔道,精子穿过透明带。
b透明带反应:在精子穿过透明带 触及卵黄膜的瞬间(即精、卵识别时) ,产生了阻止后来
精子进入透明带的生理反应 [它是防止多精子入卵受精的第一道屏障 ];
c卵黄膜的封闭作用: 精子外膜和卵黄膜融合,精子入卵后,卵黄膜会拒绝其他精子再进入 卵内的过程[它是防止多精子入卵受精的第二道屏障 ];精子尾部脱落,原有核膜破裂形成雄 原核,同时卵子完成减数分裂第二次分裂,形成雌原核
[★★★注意:受精标志 是第二极体的形成(或在卵黄膜与透明带之间看到 2个极体);受精
完成标志是雌雄原核融合成合子]。
4.胚胎发育的基本过程
卵裂期:特点:细胞有丝分裂,细胞数量不断增加,但胚胎的总体体积并不增加,或略有 减小
桑椹胚:特点:32个细胞左右的胚胎。胚胎形成致密的细胞团,形似桑椹。 [之前所有细
胞都能发育成完整胚胎的潜能属 全能细胞];
囊 胚:特点:细胞开始出现分化(该时期细胞的 全能性仍比较高),其中聚集在胚胎一端
个体较大的细胞叫 内细胞团将来发育成胎儿的各种组织;胚胎内部逐渐出现 囊胚腔[注:囊
胚的扩大会导致 透明带的破裂,胚胎伸展出来,这一过程叫 孵化];
原肠胚:特点:有了三胚层的分化,具有囊胚腔和原肠腔。内细胞团 表层形成外胚层,下
方细胞形成内胚层,由 内胚层包围的腔 叫原肠腔。滋养层发育成胎膜和胎盘;
[★★细胞分化在胚胎期达到最大限度 ]
(二 )胚胎工程的理论基础(识记)
胚胎工程的概念及技术手段 :是指对动物早期胚胎或配子或受精卵所进行的多种显微操作
和处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎冷冻保存、性别控制、胚胎干细胞培
养等技术。经过处理后获得的胚胎,还需移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类的各种 需求。
体外受精过程[属有性生殖过程]:
A.卵母细胞的采集和培养: 对体型小的动物(如实验动物鼠、兔以及猪、羊等) 用促性腺 激素处理,从输卵管冲取卵子(可 直接受精);对体型大的动物(大家畜或大型动物) 从卵 巢中采集卵母细胞(要在体外培养成熟)
b.精子的采集:假阴道法、手握法和电刺激法;
精子的获能:对啮齿动物、兔、猪 等的精子用 培养法(放入人工配制的 获能液中);对牛、 羊等精子用化学法(放在一定浓度的 肝素或钙离子载体溶液 中)
C.获能的精子与培养成熟的卵子(卵母细胞)在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过 程。
胚胎的早期培养:(胚胎体外培养是胚胎工程的核心技术)
a培养液成分(发育培养液):无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、 血清等 [注意发育培养液与动物细胞培养液成分的比较 :动物细胞培养液成分:葡萄糖、无机盐、 维生素、激素、氨基酸、促生长因子、微量元素、血清等 ];
【胚胎移植的方法:手术法可(引出受体子宫和卵巢,将胚胎注入子宫角,缝合创 口)和非手术法(将装有胚胎的移植管送人受体母牛子宫的相应部位注入胚胎) 】
★★★早期胚胎培养与动物细胞培养的区别:
所属的生物工程
动物细胞培养技术属于细胞工程中的 动物细胞工程;早期胚胎培养技术属于 胚胎工程。
培养的目的
动物细胞培养技术主要是为了 大规模培养组织细胞来获得大量细胞产物(如干扰素、单克隆 抗体等)或者获取 细胞本身(用于检测有毒物质,生理、病理、药理等研究) ;早期胚胎培
养技术是为了得到早期胚胎。
细胞的来源:动物细胞培养的细胞大多取自 动物胚胎或出生不久的幼龄动物组织或器官, 还需用胰蛋白酶将动物组织分散成单个细胞 进行培
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