陕西关中牛源产ESBL大肠埃希菌耐药特征及传播机制.pdfVIP

摘 要 摘 要 大肠埃希菌作为条件致病菌之一，与动物的健康密切相关，也是引起奶牛场常见 疾病如犊牛腹泻、乳房炎及子宫内膜炎等的主要病原菌。中国是一个抗生素使用大国， 作为治疗或添加剂使用在动物身上的抗生素数量惊人。一些临床常用抗生素，如β-内 酰胺类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类已逐渐减弱甚至丧失疗效。动物源大肠埃希菌的耐 药性不仅会制约畜牧业的发展，同时会通过食物链、空气、土壤及水源污染等途径传 播，与人类的健康也息息相关。目前，关于动物源大肠埃希菌耐药性的报道在世界范 围已逐年增多且极具多样性，引起了各国研究人员的关注。超广谱β-内酰胺酶（Extended spectrum β-lactamases,ESBL）能够水解超广谱头孢菌素类抗生素，编码该酶的基因多 由质粒携带，以极快的速度在人类及动物中蔓延，导致了严重的细菌耐药性。本研究 从陕西关中地区犊牛粪便样品中分离鉴定产ESBL 的大肠埃希菌，检测其耐药特征及 分子流行病学分型，研究其传播机制，取得结果如下： 1. 从陕西关中地区4 个奶牛场分离到75株大肠埃希菌，经过ESBL 表型确证试验 表明59 株 （78.67%）产ESBL 且皆表现为多重耐药。59 株ESBL 阳性大肠埃希菌中 bla bla bla bla 100.00% 67.80% 3.39% 1.70% CTX-M、 TEM-1、 CMY-2 和 DHA-1 的检出率分别为 、 、 和 ， blaCTX-M-55 （n 36）是最主要的blaCTX-M 基因。42.37%的ESBL 阳性菌株携带16SrRNA 甲基化酶基因，18株同时携带rmtB 和blaCTX-M-55；67.80%的ESBL 阳性菌株至少携带一 PMQR qnrS 70.00% 1 bla 个 基因，其中以 （ ）最常见。值得注意的是，株菌同时携带 CTX-M-55、 blaTEM-1、blaDHA-1、blaCMY-2、rmtB、qnrS、qnrB、aac(6’)-Ib-cr 8种基因。 2. 产ESBL 大肠埃希菌最常见的系统发育组为C 组，表明本试验分离的产ESBL 59 ESBL 27 ST 大肠埃希菌多为共生型；在 株产 大肠埃希菌中检测到 种不同的 型，其 中ST744 为主要流行的 ST 分型，ST23 为主要的克隆复合体，表明该地区产ESBL CC 大肠埃希菌有一定的遗传多样性。 3. 36 bla ESBL 28 选取 株携带 CTX-M-55 的 阳性大肠埃希菌进行接合转移试验， 株可 通过接合转移将质粒转移至E.coli26R793，其中10 （10/18，55.56%）株菌携带的rmtB 基因伴随着blaCTX-M-55 基因成功转移到E.coli26R793。在36株携带blaCTX-M-55 的供体菌 28 IncFIB IncI1 IncFrepB IncN 4 及 株接合子中共同检测到 、 、 和 种不同型的复制子， 其中以IncFIB 型为主；此外，菌株获得的外源耐药基因可稳定遗传，不影响其生长趋 势；ISEcp1元件为blaCTX-M-55 基因在不同菌株间的传播及扩散提供了有利条件。 关键词：大肠埃希菌；ESBL；blaCTX-M-55；牛 I 目 录