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- 2021-01-27 发布于河南
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(时间管理)时间分辨技术的原理最新资料
时间分辨技术的原理
目前最先进的免疫检测技术:
1、 时间分辨原理:
用三价稀土离子及其鳌合剂作为示踪物,代替荧光物质、同位素或酶,标记蛋白质、多胎、激素、抗体、核酸探针或生物流行性细胞,当反应体系发生后,用时间分辨仪器测定最后产物中荧光强度。根据荧光强度或相对荧光强度比值,来判断反应体系中分析物的浓度,达到定量分析之目的。
2、 时间分辨原子标记物的特点:
发射光和激发光有较大的 STOKES 位移——高特异性
长寿命荧光,降低其他物质的荧光干扰——高灵敏度
半衰期长达几十万年,试剂受干扰小——高稳定性
原子标记和大分子标记物的对比
原子标记物
大分子标记物
标记位点
多个,可达 20 个
只有 1 个
对被标记物蛋白活性的影响
影响小,基本无影响
影响大,经常影响蛋白活性
对被标记物空间结构的影响
无影响,保证稳定性
影响大,造成试剂的不稳定
受环境因素的影响
影响小
影响大,温度影响
3、波长分辨:
标记离子的荧光激发光波长范围较宽,发射光光谱范围较窄,是类线光谱,有利于降低本底荧光强度,提高分辨率。
激发和发射光之间有壹个较大的 STOKES 位移,有利于排除非特异
荧光的干扰,增强测量的特异性。
4、时间分辨:
标记离子螯合物产生的荧光强度高,寿命长,有利于消除样品及环境中荧光物质对检测结果的影响。
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