多聚酶链式反应扩增dna片段.docVIP

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题:多聚酶链式反应扩增DNA片段 ?学情分析: 本课题的内容,由于学生刚刚接触到多聚酶链式反应扩增DNA(即PCR技术)的相关知识,对什么是PCR技术没有感性上的认识,也无理性的认识,所以如何调动学生的积极性,充分参与到学习与认知的过程中来,是教师上这节课的重要目标。为了上好这节课,我从指导思想、教学方法、教学目标及学法等各方面做了充分的准备。 教学指导思想:以学生为中心,在整个教学过程中由教师起组织者、指导者、帮助者和促进者的作用,利用情景、协作、会话等学习环境,充分发挥学生的主动性、积极性和首创精神,最终达到使学生有效地实现对当前所学知识意义建构的目的。 教学方法的设计:上本节课我主要采用建构主义的教学方法,充分结合教材特点和学生实际,根据本节课的知识特点,先建立知识框架,在教师情景创设的引导下,通过介绍PCR是一种在体外迅速扩增DNA片段的技术,并说明这一技术在遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学研究、基因克隆等方面都有着广泛的应用,以增强学生学习的兴趣和自信心,然后再说明本课题的目标。 教学目标:主要包括三个方面,第一是知识与技能,理解PCR的原理;第二是过程与方法,体验PCR这一常规的分子生物学实验方法,培养、学生分析、思考、探究的能力,以及初步学会实验设计的思路;第三是情感态度与价值观,了解PCR的应用,要求学生勤于思考,让学生在课堂上通过发现问题,发表见解,提高对自我价值的认识,并感到学习成功带来的快乐。 学法设计:让学生用探索法、发现法去建构知识,用书本上学到的基本知识和原理来转化为自己设计实验的依据,并寻求解决问题的答案。在教学过程中,先引导学生回忆必修2的有关DNA在细胞内复制的知识,了解DNA双链的方向,区分DNA的3’端和5’端。在此基础上,让学生考虑我们在体外进行DNA的复制需要创造哪些条件及原料、酶等成分,引导学生思考和分析,通过小组间的讨论,自己设计实验,培养学生发现问题、分析问题、解决问题能力。在学生清楚了参与PCR的各种组成成分和反应条件的基础上,对于PCR反应过程的教学难度和重点就可以逐一突破了,每一轮反应的三个基本步骤—变性、复性、延伸,每一步骤的作用也就迎刃而解了。如为什么至少需要两种引物、为什么需要耐高温的TaqDNA聚合酶、子链延伸的方向为什么从引物的3’端延伸等等这些问题。上完这节课后,学生的学习情况是令人满意的,在某些方面还达到了另人意想不到的效果,值得我在今后的教学中认真借鉴。 教学重点:PCR的原理和PCR的基本操作 教学难点:PCR的原理 教学准备:PPT课件,多媒体视频 教学过程: (一)引入新课 在现代生物技术中,DNA技术可谓是尖端技术。人类基因组计划、基因工程、基因诊断、基因检测、古生物鉴定等都离不开对DNA分子碱基序列的分析。而分析DNA碱基序列,就需要一定量的DNA片段。怎样迅速获得足够量的DNA片段呢?今天我们来研究学习DNA分子的扩增技术――PCR技术。 (二)进行新课 1.基础知识 PCR技术扩增DNA的过程,与细胞内DNA复制过程类似: (1)??? 细胞内DNA复制条件分析: 条件 组分 作用 模板 DNA的两条单链 提供复制的模板 原料 四种脱氧核苷酸 合成DNA子链的原料 酶 解旋酶 DNA聚合酶 打开DNA双螺旋 催化合成DNA子链 能量 ATP 为解螺旋和合成子链供能 引物 RNA 为DNA聚合酶提供合成的3’端起点 (2)??? 细胞内DNA复制过程 1)DNA的反向平行结构:(结合投影图) 核苷酸分子的结构与方向性:(分子结构模式图) 由核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接形成核苷酸长链:(模式图,体现方向性)。 DNA双螺旋结构的反向平行结构: 2)DNA的复制过程: 解??旋:解旋酶、ATP,DNA两条链打开,,形成两条DNA单链。 引物结合:在DNA单链3’端与DNA反向配对结合,确保引物3’端与DNA单链准确配对。 DNA聚合酶结合: 子链合成:DNA聚合酶从引物3’端开始,将配对的脱氧核苷酸连接起来。 后续加工:DNA聚合酶I将引物切去,并合成空缺处的DNA单链,再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来(半不连续合成。先导链,滞后链) 子链合成特点:不能从头合成;合成方向为“5’→3’合成”。 感悟生命的神秘:DNA聚合酶不但能够催化磷酸二酯键的形成,还具有校对功能。它在每引入一个核苷酸后都要复查一次,只有碱基配对无误后才能继续往下聚合,它不能从头合成。RNA聚合酶没有校对功能,因此RNA的合成不需要引物,而是从头合成的,它的错配可能性较大,在RNA引物完成功能后即被DNA聚合酶I删去,代之以高保真的DNA链。 [思考]DNA分子能准确复制的原因有哪些? DNA双螺旋结构提供模板;碱基互补配对;DNA聚合酶的复查功能。 [思考]细胞

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