仪器分析技术 离子交换色谱法基础知识 离子交换柱色谱法基础知识.docVIP

离子交换柱色谱法基础知识 一、离子交换柱色谱定义 以离子交换树脂为固定相的柱色谱法称为离子交换柱色谱法。利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。 凡在溶液中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法进行分离。现在它不仅适用于 无机离子混合物的分离，亦可用于有机物的分离，例如氨基酸、核酸、蛋白质等生物大分子，因此应用 范围较广。 二、离子交换树脂及其性能 离子交换树脂是具有网状结构的复杂的有机高分子聚合物。网状结构的骨架部分一般很稳定，不溶于酸、碱和一般溶剂。在网状结构的骨架上有许多可被交换的活性基团。如磺酸基（-SO3H）、羧基（-COOH）、季胺基（-N+(CH3) 3）等，正是由于这些基团的存在，才使树脂具有交换的能力。 图1 离子交换树脂 图2 离子交换树脂柱 1.离子交换剂的分类 离子交换树脂的种类很多，常用的是聚苯乙烯性离子交换树脂，它以苯乙烯和二乙烯苯聚合成球形的网状结构，其中二乙烯苯是交联剂，经浓硫酸磺化后，即得聚苯乙烯型磺酸基阳离子交换树脂，如果用其它基团代替磺酸基，就可以得到一系列阳离子交换树脂，例如-COOH、-OH等，这些基团上的氢离子可被样品中的阳离子交换。阴离子具有与阳离子交换树脂同样的有机骨架，只是在骨架上引入了可离解的碱性基团。 按结合基团不同， 离子交换树脂可分为 阳离子交换树脂和 阴离子交换树脂。1）阳离子交换树脂 该树脂上具有与样品中阳离子交换的基团，交换基团主要是磺酸基（-SO3H）、磷酸基（-PO3H2）、羧酸基（-COOH）、 酚羟基（-OH）。 2）阴离子交换树脂 该树脂上具有与样品 中阴离子交换的基团，交换的基团主要是伯胺基（-NH2）、仲胺基（-NHCH3 ）、叔胺基（-N(CH3)2）、季胺基（-N+(CH3) 3 ） 。 2．离子交换树脂的特性 1）重量交联度 即树脂中所含交联剂的百分率。树脂的交联度越大，则网眼越小，交换时体积大的离子进入树脂便受到限制。但提高了交换的选择性；另外，交联度大时，形成的树脂结构紧密，机械强度高。但是如果交联度过大则对水的膨胀性能差，交换反应的速度慢，因此要求树脂的交联度一般为8～12％。 2）交换容量 离子交换树脂的交换容量表示其可交换离子量的多少。其表示单位有以下两种，质量表示法：即单位质量离子交换树脂吸着能力，通常用mmol/g表示；体积表示法：即单位体积离子交换树脂的吸着能力，通常用mmol/mL表示。? 3）溶胀 干树脂在水溶液中吸水后造成体积膨胀的程度。溶胀的程度取决于交联度的高低，交联度高，溶胀小；交联度低，溶胀大。 4）粒度 树脂颗粒大小，一般是以溶胀状态所能通过的筛孔来表示。交换纯水用的树脂多为10～50目，分析用则为100～200目。 三、分离原理 以磺酸基阳离子交换树脂为例，溶液中的阳离子，如Na+,与H+发生交换，当树脂上的所有可交换的H+均被交换后，树脂失去活性，此时若用稀酸溶液对树脂进行处理，Na+就被高浓度H+置换下来，树脂的交换能力又被恢复，这一过程称为树脂的再生，交换和再生的过程可用下式表示： 交 交换 再生 RSO3 – H+ ＋Na+ RSO3 -Na +＋H+ 再生 阴离子交换树脂交换原理如下所示： 交 交换 再生RN+（CH3）3OH - ＋Cl- RN+（CH3）3Cl - ＋OH- 再生 用离子交换树脂分离不同离子时，样品组分离子与流动相离子在树脂上产生竞争交换，交换能力弱的离子易被流动相洗脱，交换能力强的后被洗脱，从而使样品组分达到分离的效果。 四、流动相 离子交换色谱的流动相最常用水缓冲溶液，有时也使用有机溶剂如甲醇、乙醇同水缓冲溶液混合使用，以提供特殊的选择性，并改善样品的溶解度。离子交换色谱所用的缓冲液，通常用下列化合物配制：钠、钾、钡的柠檬酸盐，磷酸盐，甲酸盐与其相应的酸混合成酸性缓冲液或氢氧化钠混合成碱性缓冲液等。