稳定同位素标记衍生化UHPLC-MS_MS用于代谢物和药物分析.pdfVIP

摘要 摘 要 超高效液相色谱-质谱联用技术（UHPLC-MS/MS ）的应用涉及到各个分析领域。该技 术结合了液相色谱的良好分离能力和串联质谱的高特异性检测的特点，适于复杂生物样本 的分析检测。化学衍生化可提高质谱离子化效率和检测灵敏度。但因样品基质复杂、待测 物种类较多，为了降低质谱响应的差异，在质谱分析前需加入同位素内标。通常情况下大 多数同位素内标难以获得和合成困难，因此稳定同位素标记衍生化成为一种可供选择的方 法，提高了分析的灵敏度和准确度。生物样品中的复杂基质和来自于衍生化过程的过量衍 生试剂通常对UHPLC-MS/MS 检测带来严重的基质干扰和仪器损环。因此，仪器分析前进 行有效的样品前处理是有必要的。基于氧化石墨烯和分子印迹聚合物作为吸附剂的磁分散 固相萃取（MDSPE ）是利用外部磁场作用使分析物与基质实现分离，具有良好的吸附效率 和快速分离能力。 本论文介绍了三种新型的联用技术并利用UHPLC-MS/MS 分别检测大鼠微透析液中 含羟基的胆固醇及其代谢物、雷公藤甲素、天麻素及其代谢物对羟基苯甲醇。具体工作如 下： 第一章：简述超高效液相色谱串联质谱，样品前处理技术中的稳定同位素标记衍生化、 分散固相萃取、氧化石墨烯及分子印迹技术的研究进展。 第二章：设计合成一对稳定同位素标记衍生试剂 d -/d -3-N- 甲基-2’-羧基罗丹明 6G 0 3 （d -/d -MCR6G ）标记分析物；以磁性氧化石墨烯作为分散固相萃取的吸附剂进行吸附萃 0 3 取，同时联合超高效液相色谱串联质谱技术测定大鼠血液微透析液中含羟基的胆固醇及其 代谢物。 第三章：采用稳定同位素标记衍生化试剂 d -/d -MCR6G 标记分析物；以雷公藤甲素 0 3 衍生物为模板分子合成磁性分子印迹聚合物，以此为吸附剂对衍生物进行吸附萃取；同时 结合超高效液相色谱串联质谱法测定大鼠脑和血液微透析液中雷公藤甲素的药代动力学 研究，该方法灵敏、快速，为雷公藤甲素药效作用研究提供了一种新方法。 第四章：利用d -/d -3-N- 甲基-2’-碳酰氯罗丹明6G （d -/d -MCCR6G ）与酪醇的衍生物 0 3 0 3 作为虚拟模板分子合成一种新的磁性分子印迹材料，同时采用微波辅助稳定同位素标记衍 生-磁分散固相萃取技术结合超高效液相色谱串联质谱法，同步检测大鼠体内天麻素及其代 谢物对羟基苯甲醇的药代动力学。 关键词：超高效液相色谱串联质谱，稳定同位素标记衍生化，磁分散固相萃取，磁性 氧化石墨烯，磁性分子印迹聚合物，含羟基的胆固醇及其代谢物，雷公藤甲素，天麻素 I Abstract Abstract Ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/MS) technique was applied in various fields of analysis. The technique combined the good separation ability of liquid chromatography with the high specificity detection of tandem mass spectrometry, and it was suitable for the analysis and detection of complex biological samples. Chemical derivatization can improve