红细胞渗透脆性的测定.docxVIP

???????????????????????医 料推荐??????????????????? 红细胞渗透脆性的测定 [ 目的与原理 ] 掌握 定 胞渗透脆性的方法， 定不同 胞渗透脆性 并理解 胞外液渗透 持 胞正常形 与功能的重要性。 正常情况下， 物 胞内的渗透 与血 的渗透 相等， 哺乳 物 相当于 0.9 ％ NaC1溶液的渗透 ， 的等渗溶液 0.85 ％～ 1.0 ％NaC1溶 液。将 ? [ 目的与原理 ] 掌握 定 胞渗透脆性的方法， 定不同 胞渗透脆性并理解 胞外液渗透 持 胞正常形 与功能的重要性。 正 常情况下， 物 胞内的渗透 与血 的渗透 相等，哺乳 物 相当于 0.9 ％ NaC1溶液的渗透 ， 的等渗溶液 0.85 ％～ 1.0 ％NaC1溶 液。将 胞置于等渗溶液中， 其形 和容 可保持不 。若将 胞 浮于低渗的NaC1溶液中， 水分 入 胞使之膨 甚至破裂溶解，但 胞 低渗溶液 具有一定的抵抗力，其抵抗力 大小与 胞膜脆性有关。通常用不同 度的 NaC1溶液来 定 胞膜的渗透脆性， 胞膜渗透脆性大的， 低渗 NaC1 溶液的抵抗力小， NaC1溶液 的渗透 稍有降低， 此 胞便 生破裂而溶血。反之，脆性小的 NaC1溶液的抵抗力大， Nac1 溶液的渗透 降到很低 才使 些 胞破裂溶血。 刚 能引起一部分 胞溶解的低渗 NaCl 的 度可以代表最小抵抗 ；使全部 胞溶解的 NaCl 度 最大抵抗 。通常就以抵抗 表示 胞的渗透脆性。在 成熟的 胞，其膜的渗透脆性 小，而衰老的 胞膜的渗透脆性 大。 [ 象 ] 、 或草 。 [ 试剂 与器材 ] 5 毫升无菌注射器，消毒棉球，中 管，小 管， 管架，滴管， 1%NaCl， 蒸 水， 75%酒精，碘酒，凹瓷 ， 1%肝素 或 10%草酸 溶液， 3.8% 枸 酸 。 [ 步 ] 1、 取小 管 10 支， 号后，按下表制成不同 度的 NaCl 溶液。 管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1%NaCl (ml) 0.90 0.65 0.60 0.55 0.5 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 蒸 水（ ml） 0.1 0.35 0.40 0.45 0.5 0.55 0.6 0.65 0.70 0.75 NaCl 溶液 度 0.9 0.65 0.60 0.55 0.5 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 （%） 2、用 湿 抗凝 的注射器 从 尾静脉采 1 毫升血，立即向每一 管中各加一 滴血，将 管 在两掌心中迅速搓 ，使血液与管内 NaCl 溶液混匀（切勿用力 震 ），室温下放置 2 小 后 察 果。多余血液注入盛有 0.1 毫升 3.8% 枸 酸 的 管内。加以混合，以 重复 使用。 3、 察 果： 开始溶血和完全溶血的两管 NaCl 溶液 度。 按下列 准判断有无溶血、不完全溶血或完全溶血。 1）上清液无色，管底 混 色或有沉淀的 胞，表示没有溶血。 2）上清液呈淡 色，管底 混 色表示只有部分 胞破裂溶解， 不完 全溶血。开始出 部分溶血的 NaCl 溶液 度，即 胞的最小抵抗 ，也是 胞的最大脆性。 1 ???????????????????????医 料推荐??????????????????? 3）管内液体完全变成透明的红色，管底无细胞沉积，为完全溶血。引起红细胞完全溶解的最低 NaCl 溶液浓度，即为红细胞的最大抵抗值，即红细胞的最小 脆性。 [ 方法评估 ] 该方法筒单实用，但应严格控制血量（血液和 NaCl 溶液之比约为 1:25 ）和防止血标本在体外溶血， 否则易影响试验的准确度。 本试验敏感性较差， 需结合其他 实验室检查结果进行分析。 [ 应用意义 ] 渗透脆性指标对于掌握细胞膜的特性、 形态和生理功能具有一定意义， 如膜的特 性、流动性、结构、组成成分等的改变，均使膜的脆性发生改变。 [ 注意事项 ] 1、配制 1.0%NaCl 溶液，称量必须准确。 2、取血时一定要避免溶血。 3、滴加血液时要靠近液面，使血滴轻轻滴入溶液以免血滴冲击力太大，使红细胞破损而造成溶血的假象。． 4 、加入血滴后，轻轻摇匀溶液，切勿剧烈振荡。 5、应在光线明亮处观察结果。如对完全溶血管有疑问，可用 离心机离心后，取试管底部液体一滴，在显微镜下观察是否有红细胞存在。 2