vegf对非小细胞肺癌转归的影响-文档资料.pptVIP

VEGF 对非小细胞肺癌转归的影响 中国武警医学院附属医院肿瘤中心 穆海玉 前言 ? 肺癌是当今世界上对人类健康和生命危害最大的恶性肿瘤，随着传统 化疗进入了一个平台期，靶向治疗引起人们的高度关注。实验显示新生 血管生成是肿瘤生长与转移的解剖学和生理学基础，因此研究可能影响 肺癌血管生成的因素，寻找有效的抗血管生成药物，可望在很大程度上 改变肺癌治疗的现状。研究显示：血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor VEGF ）是肺癌血管生成的关键因素。本 实验采用 SP 免疫组织化学方法，检测肺癌组织中 VEGF 的阳性表达，分 析研究它与微血管密度（ microvessel density MVD ）之间的关系及 与临床病理、组织分型和转移之间的联系，以探讨 VEGF 在肺癌血管生 成中的作用。 对象及分组 （ 1 ） 肺癌组：共 40 例，平均年龄 52.6 岁，其中男 21 例，女 19 例。所有患者术前均未接受放化疗。所有标本均重新切片后经 HE 染色证实为肺癌。其中鳞癌 21 例，腺癌 14 例，小细胞未分 化癌 5 例；高分化 20 例，中分化 7 例，低分化 8 例；Ⅰ期＋Ⅱ期 21 例，Ⅲ期＋Ⅳ期 14 例。 （ 2 ） 肺良性病组：共 12 例，男 9 例，女 3 例；平均年龄 49.8 岁。 标本重新切片后经 HE 染色证实 7 例为结核球、 5 例为肺炎。 （ 3 ） 正常对照组：共 10 例，男 6 例，女 4 例；平均年龄 47.6 岁。 经 HE 染色证实为正常肺组织。 方法 所有石蜡标本均行 5 切片，连续切 4 片，置 60 度烤箱内烤 30 分钟。 所有切片分别经二甲苯脱蜡，无水酒精及其它不同浓度酒精脱苯， 自来水洗 2 分钟水化。必选一张切片行 HE 染色核实病理诊断。采 用 SP 免疫组织化学染色法，按药盒操作规程进行。以 PBS 代替一 抗作阴性对照，用武汉博士德生物工程有限公司提供的已知阳性 切片作阳性对照。 结果判定 ? VEGF 表达的判定：镜下癌细胞浆呈棕黄色颗粒状 者为阳性，细胞浆呈透明或无色者为阴性，每张切 片中观察 5 个高倍视野〔 200 ×〕， 每一视野记数 100 个细胞，阳性染色细胞＜ 10% 为 阴性， ≥ 10% 为阳性。 ? MVD 的测定： 参考 Weidner 方法，先在低倍镜下扫视整个切 片，确定对 F Ⅲ Ag 明显着棕褐色微血管密度最高区，即 “热点”。 然后换成高倍镜进行记数。凡在肿瘤组织中与邻近微血管、肿瘤 细胞及其它结缔组织分界清楚的任何一个染成棕褐色的细胞或细 胞簇均被认为是一个血管；只要结构不相连，其分枝结构也算作 一个血管。但不能用有无红细胞的出现及是否形成管腔来记数血 管数。已形成明显肌层的血管不参与计数，结果以 3 个视野血管 的均数表示。 统计学处理 ? 计量资料数据采用均数±标准差表示，所 得数据采用 t 检验和方差分析；计数资料采 用 x 2 检验。 结果 1--- 三种肺组织中 MVD 分布情况 阳性染色局限于血管内皮细胞膜，呈棕褐 色，微血管形态不规则，在癌组织中的分 布呈异质性，大多集中在肿瘤边缘。 ? 表 1 MVD 在三种肺组织中的表达 n MVD 肺癌组 40 20.78 ± 5.86 良性组 12 6.83 ± 1.23 正常组 10 5.20 ± 1.13 P 值 P 良 =0.003 P 正 =0.002 结果 2--VEGF 在三种肺组织中的表达 VEGF 着色为棕黄色颗粒，阳性染色主要分布于癌细 胞胞浆中，在肿瘤坏死灶周围尤为明显。肺癌组织 VEGF 阳性率显著高于肺良性病变和正常对照组。 见表 2 表 2 VEGF 在三种肺组织中的表达 例数 VEGF+ VEGF- P 值 肺癌 40 25 15 P 癌症 - 良性 = 0.014 肺良 12 2 10 P 癌症 - 正常 =0.001 正常