第11章色谱分析法概述新.pptVIP

第11章 色谱分析法概论 11.1 概述 11.2 色谱法基础知识 11.3 色谱分离的基本理论 11.4 色谱法的发展趋势 11.1概述11.1.1色谱法的起源和发展 1906年俄国植物学家茨维特 (M.Tswett) 从分离植物色素实验中发明了色谱分离方法。 俄国植物学家 茨维特 色谱法(Chromatography) 石油醚 (流动相) 碳酸钙 (固定相) 纯组分 色谱柱 混合色素 叶绿素 叶黄素 胡萝卜素 表11-1 色谱法的发展简史 年代 发明者 发明的色谱方法或重要应用 1906 Tswett 用碳酸钙作吸附剂分离植物色素。最先提出色谱概念。 1931 Kuhn, Lederer 用氧化铝和碳酸钙分离α-,β-,γ-胡萝卜素。色谱法受重视。 1938 Izmailov, Shraiber 最先使用薄层色谱法。 Taylor, Uray 用离子交换色谱法分离了锂和钾的同位素。 1941 Martin, Synge 提出色谱塔板理论；发明液-液分配色谱；预言了气相色谱。 1944 Consden等 发明了纸色谱。 1949 Macllean 在氧化铝中加入淀粉黏合剂制作薄层板使薄层色谱进入实用阶段 1952 Martin, James 从理论和实践方面完善了气-液分配色谱法。(1952诺贝尔奖) 1956 Van Deemter等 提出色谱速率理论，并应用于气相色谱。 1957 基于离子交换色谱的氨基酸分析专用仪器问世。 1958 Golay 发明毛细管柱气相色谱。 1959 Porath, Flodin 发表凝胶过滤色谱的报告。 1964 Moore 发明凝胶渗透色谱。 1965 Giddings 发展了色谱理论，为色谱学的发展奠定了理论基础。 1975 Small 发明了以离子交换剂为固定相、强电解质为流动相，采用抑制型电导检测的新型离子色谱法。 1981 Jorgenson等 创立了毛细管电泳法。 表11-2 色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作 年代 获奖学科 获奖研究工作 1937 化学 胡萝卜素化学，维生素A和B 1938 化学 胡萝卜素化学 1939 化学 聚甲烯和高萜烯化学 1950 生理学医学 性激素化学及其分离、肾皮素化学及其分离 1951 化学 超铀元素的发现 1955 化学 脑下腺激素的研究和第一次合成聚肽激素 1958 化学 胰岛素的结构 1961 化学 光合作用时发生的化学反应的确认 1970 生理学医学 关于神经元触处迁移物质的研究 化学 发现糖核苷酸及其在生物合成碳水化合物中的作用 1972 化学 核糖核酸化学酶结构的研究 生理学医学 抗体结构的研究 11.1概述11.1.1色谱法的起源和发展 1906，俄国植物学家 M.Tswett 发明色谱法，是色谱之父。 1931，对液固吸附色谱的杰出贡献者库恩，分离出60多种胡萝卜素，核黄素、维生素，获1938年诺贝尔化学奖。 蒂塞利乌斯(Tiselius)因电泳分析方法的研究，发现血清蛋白组分，获1948年诺贝尔化学奖。 1941，马丁(Martin)和辛格(Synge)创始分配色谱特别是纸色谱而共获1952年诺贝尔化学奖。 氨基酸自动分析仪发明人S·穆尔(Stanford Moore)和W.H.斯坦(William Howard Stein),定量分析方法解决了有关氨基酸、多肽、蛋白质等复杂的生物化学问题，获1972年诺贝尔化学奖。 色谱法又称层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的弱作用力(静电力、诱导力、色散力和氢键)的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次“平衡”，实现差速移行，使各溶质达到相互分离。 固定相：在色谱分离中固定不动，对组分产生保留的作用一相。 流动相：带动组分向前移动的另一相，与固定相处于平衡状态。 分离对象：各组分分子之间的结构相似、性质相近的混合样品。 11.1概述 11.1.2色谱法的定义与分类 定义 分类 根据流动相的状态将色谱法分成四大类。 表11-3 色谱法以流动相种类的分类 色谱类型 流动相 主要分析对象 气相色谱法 气体 挥发性有机化合物 液相色谱法 液体 溶于水或有机溶剂的各种物质 超临界色谱法 超临界流体 各种有机化合物 电色谱法 缓冲溶液、电场 离子和各种有机化合物 11.1概述 11.1.2色谱法的定义与分类 定义 分类 11.1概述 11.1.2色谱法的定义与分类 1.按两相分子的聚集状态分类 2. 按固定相的固定方式分类 柱色谱：填充柱、毛细管柱色谱 平面色谱：纸色谱、薄层色谱 分配色谱：利用分配系数的不同 吸附色谱：利用吸附性能的差异 离子交换色谱：利用离子交换能力不同 空间排阻色谱：利用排阻作用力的不同 3.按分离的机制分