【国自然】国家自然基金标书－终稿.docxVIP

陈述正文 立项根据与研讨内容（4000-8000字）： 项意图立项根据 跟着机械通气、外表活性物质替代疗法等新技能使用，危重重生儿、尤其是早产儿存活率已明显进步。但是，长时刻吸入高浓度氧，幸存者易产生肺部氧化应激损害。现在，高氧肺损害已成为发达国家NICU最为扎手的问题之一和婴儿缓慢肺疾病的最常见方式。但高氧肺损害的切当机制没有彻底说明，更无有用的防治手法。因而深化研讨其发病机制，活跃防治高氧肺损害，具有优生优育、进步人口素质的战略意义。 高氧肺损害是一个触及许多细胞活动的杂乱进程，可分为前期的安排损害（弥散性肺泡炎）和晚期的损害后修正（肺间质重构）两个进程。细胞外基质（extracellular matrix,ECM）的重建参加了高氧肺损害的整个病理进程，若ECM重建正常，则损害彻底修正，肺结构正常；若ECM重建紊乱，将导致肺纤维化。因而，ECM重建是联系高氧肺损害结局的要害要素。本试验室在国内外首先展开了对早产大鼠高氧肺损害中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）和其按捺剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)表达的研讨，已发现肺损害时MMPs过度表达、MMPs/TIMPs失衡是ECM重建紊乱产生纤维化的要害原因 [1]（详细研讨成果见研讨根底栏）。有关MMPs在高氧肺损害中的效果已为少量国外学者所注重，但高氧肺损害后ECM重建进程中，引起MMPs过度添加的详细机制是什么？本试验室拟从MMPs的诱导剂和按捺剂两方面深化研讨。 细胞外基质金属蛋白酶诱导剂（extracellular matrix metalloproteinase inducer,Emmprin）在上调MMPs表达中起要害效果。Emmprin是分子量为58KD的质膜糖蛋白，具有酪氨酸蛋白激酶活性，不只表达于正常安排，还表达于肿瘤安排如肺部肿瘤细胞，提示Emmprin参加体内生理及病理进程[2]。现在，少量文献已证明，体外Emmprin与人成纤维细胞共培育后，成纤维细胞MMPs表达添加。进一步研讨标明，Emmprin在细胞外表与本身受体或MMP结合，激活胞内MAPK p38信号通路，该途径激活促进ECM降解[3，4]。但关于Emmprin/MAPK p38对MMPs调理的研讨仅限于肿瘤细胞，有关高氧肺损害后肺ECM重建进程中，Emmprin怎么调控MMPs/TIMPs平衡，现在国内外尚无文献报导。 转化生长因子β（Transforming growth factor beta, TGF-β）在下调MMPs表达中起要害效果。研讨证明TGF-β影响可使肺成纤维细胞MMPs生成削减[5]。还有研讨发现，TGF-β按捺元件坐落MMP-1基因发动子区，紧密调控MMP-1在不同生理和病理状况下的表达[6]。进一步的研讨标明，TGF-β对MMP-1的效果经过SMAD信号途径介导，该途径激活可阻挠ECM降解[5]。因而，估测TGF-β/SMAD对MMPs/TIMPs平衡的调理可能是影响肺损害后ECM重建的要害要素之一。有关高氧肺损害后肺ECM重建进程中，TGF-β怎么调控MMPs/TIMPs平衡，现在国内外尚无文献报导。 近年来对信号转导体系的研讨发现，坐落大多数细胞质膜上约50-100nm巨细的囊性洼陷结构—小窝（caveolae），是许多信号分子完结跨膜信号转导的“驿站”。小窝蛋白（caveolin）是小窝胞浆面包被的一种21-24kD的膜蛋白，是许多信号分子活性状况的重要调理者。在无胞外信号影响下，caveolin一般与富集于小窝质膜上的各种信号分子、受体及非受体型酪氨酸激酶等相结合，按捺这些信号物质的活性；在激动剂与受体结合后，caveolin分子构象产生变构或共价润饰，调理信号物质的活化状况，参加信号转导调控[7]。有关caveolin在肺ECM重建中的效果，有学者提出肺泡Ι型上皮细胞caveolin表达缺失可能是产生肺纤维化的亚细胞方针。对caveolin-1基因敲除小鼠的研讨，肺安排显现肺泡隔因细胞增殖而增厚和肺纤维化。caveolin-1α在肺发育的不同阶段，可表达于不同血管和上皮细胞，呈时相散布[8]。研讨发现，caveolin –1与TGF-βⅠ型受体（TβRⅠ）相互效果，按捺TGF-β介导的SMAD-2和下流分子的磷酸化，然后调理信号转导[9]。Emmprin具有酪氨酸蛋白激酶活性，且其信号传导为酪氨酸磷酸化依靠的MAPK p38途径，申请者估测caveolin能与Emmprin相互效果，调控Emmprin介导的MAPK p38和下流分子的磷酸化。简图如下： 胞外信 caveolin +? caveolin/Emmprin效果 Emmprin/MAPK p38