【国自然】国重要食源性寄生虫病的发病机制及防治研究.docxVIP

项目名称： 我国重要食源性寄生虫病的发病机制及防治研讨 首席科学家： 余新炳 中山大学 起止年限： 2010年1月-2014年8月 依托部分： 教育部 一、研讨内容 弓形虫、旋毛虫、广州管圆线虫和华支睾吸虫是我国重要的食源性寄生虫，对我国食品安全及国民健康构成严重威胁。食源性寄生虫与宿主彼此效果所造成的的安排炎症和免疫病理损害是上述4种寄生虫病的一起病变结局。因而，寄生虫与宿主彼此效果的分子根底及其免疫调理机制是要害科学问题。 本项目环绕这一科学问题，针对上述4种食源性寄生虫病，从环境、遗传和分子生物学层面，从基因、蛋白、细胞、全体、机制和功用等诸方面有机地整合在一起进行体系研讨，从挑选食源性寄生虫诱发宿主炎症和免疫病理损害相关的基因或蛋白下手，经过对基因表达蛋白相关功用的研讨及体表里验证，承认这些寄生虫要害致病分子和免疫调理分子，并研讨这些虫体要害分子与宿主的彼此效果，说明弓形虫、广州管圆线虫、旋毛虫和华支睾吸虫的致病机制和免疫调理机制，在此根底上研讨新的干涉办法，为这些重要食源性寄生虫病防治供给新思路和新办法。 首要研讨内容： 1、寄生虫的致病要害基因或蛋白分子及其功用研讨： 对4种食源性寄生虫别离从下述的三个层面研讨其致病要害基因或蛋白: ① 使用寄生虫的分子符号，剖析从我国不同区域别离的寄生虫虫株，经过研讨虫株的基因型与致病的联络，确认盛行我国寄生虫虫株的致病基因型；②使用生物信息学技能，从寄生虫基因文库中挑选与疾病相关的潜在功用基因并进行重组表达，在体表里研讨其与致病的联络，确认致病相关基因；③富集体外培育的寄生虫排泄排泄蛋白或其间的蛋白酶组分，使用依据生物质谱的蛋白质组学技能判定，挑选并重组表达其间的相关功用蛋白，在体表里研讨其与致病的联络，确认致病相关蛋白。 2、虫体致病相关蛋白与宿主靶蛋白的彼此效果研讨 ① 使用本课题已有的高覆盖率的人类蛋白质组芯片（含17000多种人类蛋白质），寻觅能与虫体致病蛋白彼此效果的宿主靶蛋白，在体表里研讨虫体致病蛋白与宿主靶蛋白的彼此效果，从中发现与宿主免疫相关的虫体致病蛋白，并研讨其免疫相关功用； ② 使用小分子按捺剂、转基因或基因缄默沉静技能，搅扰虫体致病蛋白的功用，研讨搅扰后寄生虫虫体与宿主的彼此效果。 3、寄生虫致病机制及防治干涉研讨： ①　使用免疫磁珠分选法和流式细胞检测技能，检测动物感染后外周血液中抗原递呈细胞、效应细胞及调理性Ｔ细胞的数量改变，以及炎症细胞因子的表达水平，比较寄生虫感染进程中适合和非适合宿主细胞免疫应对与炎症发生的联络；经过细胞或动物感染模型，研讨干涉免疫细胞的活化及其相关信号通路，对寄生虫感染所造成的的炎症反响的影响。②使用细胞和动物模型，经过检测端粒酶活性、BMI1、P53、细胞周期操控相关蛋白基因表达水相等与细胞永生化及恶性转化的方针，并经过肿瘤细胞克隆构成实验和祼鼠体内成瘤实验，研讨虫体致病蛋白对宿主靶细胞的永生化及恶性转化的效果。③使用转基因或基因缄默沉静技能，构建致病蛋白缺点型虫株，研讨其对宿主的致病效果的影响；或使用小分子化合物干涉致病蛋白活性，研讨寄生虫病防治的新战略和新办法。 二、预期方针 全体方针 本项目研讨环绕“食源性寄生虫与宿主彼此效果的分子根底及其免疫调理机制”这一科学问题，针对弓形虫病、旋毛虫病、广州管圆线虫病和华支睾吸虫病4种食源性寄生虫病，从环境、遗传和分子生物学层面，从基因、蛋白、细胞、全体、机制和功用等方面有机整合在一起进行体系研讨。经过发现并验证致病相关基因和要害蛋白，研讨这些致病分子在诱导炎症、免疫病理和免疫调理方面的功用，提醒这些重要靶分子在食源性寄生虫病的发生、发展中的效果。隔阂，使用细胞模型和动物感染模型，并结合干涉研讨，从分子病理学和分子免疫学水平研讨这些致病分子与宿主彼此效果的分子机制，说明这些重要寄生虫病的致病机理，寻觅新的防治战略和办法，进步前期确诊、前期干涉及医治水平，确保食品安全，下降感染率、发病率和逝世率。使我国寄生虫病根底研讨和防治到达崇高领先水平。 五年预期方针 树立我国人兽弓形虫别离株的基因型库，清晰盛行我国弓形虫虫株的首要基因型，及其与毒力和致病的相关性，经过比较蛋白质组学技能剖析不同基因型虫株速殖子弛缓殖子基因表达差异，研讨差异蛋白的功用，说明弓形虫速殖子弛缓殖子彼此转化的分子机制并发现药物效果的新靶点，选用高通量人蛋白质组芯片，研讨致病相关基因型虫体侵略与宿主细胞之间彼此效果的分子联络，为致病基因型虫株在妊娠结局的转归点评及艾滋病等免疫低下患者的前期干涉方案的拟定供给科学依据。 2.对旋毛虫引起的食源性寄生虫病，经过发现并验证旋毛虫致病相关基因和要害排泄蛋白，研讨这些致病分子在虫体侵略肠上皮细胞和成囊进程的致病相关功用，提醒其在旋毛虫病的发生发展中的效果。隔阂，使用细胞模型