电子显微镜技术与在病理诊断上的作用.ppt

电子显微镜技术及在病理诊断上 的作用 小组成员 高玉梅 于 虹 郭 峰 刘 阳 张 杰 指导教师 吴 岩 教 授 2007 级电子显微镜技术硕士研究生课程 电子显微镜技术及在病理诊断上的作用 ? 一、电子显微镜技术 ? 二、诊断病理学 ? 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 ? 四、讨论 （一）概念 ? 电子显微镜技术：也称电子显微技术 或电子显微术 概念 电子显微镜技术 电镜精密仪器 样品制备技术 1 、电子显微镜 ： 是用电子束成像的显微镜，电子 显微镜是一种高精密度的电子光学仪器，它具有较 高分辨率本领和放大倍数，是观察和研究物质微观 结构的重要工具。 ? 发明背景： 它是在发现电子束具有波动性质及利 用磁场改变电子束行径，在上述理论的指导下发 明出的。 ? 电子显微镜主要分为两种类型 ： 一种是观察样品 内部超微结构的透射电子显微镜，另一种是揭示 样品表面形貌的扫描电子显微镜。 ? 电子显微镜特征 ： 电镜与光镜的区别 ? 扫描电镜与透射电镜比较 ：（见下表） 扫描电镜和透射电镜比较 项目 扫描电镜 透射电镜 分辨本领 70 ～ 100 ? 2 ? 发大倍数 20 ～ 40 万倍 100 万倍 加速电压 1 ～ 50 KV 几十千伏～几百千伏 图像特点 景深长、三维立体结构 景深小、两维平面结构 样品制备 固定 - 脱水 - 临界点干燥 - 喷涂金属 固定 - 脱水 - 包埋 - 超薄切片 - 重金属染色 样品尺寸 1cm 3 50 ～ 100nm 切片 样品损伤 光斑直径只有几十埃的电子束在 样品上扫描，对样品损伤极小 大约 1μm 直径电子束打到样品上，造成一 定程度损伤 样品成像信 号 二次电子、背散射电子 透射电子 发大倍数调 节 用衰减器改变扫描线圈电流，进 行放大率调节 调整中间镜电流改变放大率 决定分辨率 因素 入射电子束直径决定图像分辨率。 加速电压、透镜缩小率、电源稳定度 及像差决定电子束斑直径 加速电压、电源稳定度、像差、样品厚度 等影响分辨率 本图片来自中科科仪 本图片来自中科科仪 2 、样品制备 ? 透射电镜样品制备的常用方法： 包括超薄切片、冷冻复型、 负染色等。 ? 扫描电镜样品制备： 比透射电镜样品制备简单。除保存样品 表面形貌结构外，只要求样品干燥并能导电，而不需包埋和 切片。制备方法与透射电镜样品制备方法一样 。 电子显微镜技术及在病理诊断上的作用 ? 一、电子显微镜技术 ? 二、诊断病理学 ? 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 ? 四、讨论 二．诊断病理学概述 ? 病理学 是研究疾病病因、发病机制、形态结构、功能、代 谢变化的一门基础医学及其与临床医学之间的桥梁学科。 ? 主要包括 基础病理学、实验病理学及 诊断病理学 ( 以往称 外科病理学或临床病理学 ) 。各级医院病理科所从事的工 作主要是诊断病理学。 ? 病理检查内容 通常包括活体组织检查、手术切除标本检查、 术中冰冻检查、细胞学检查、尸体解剖检查等。 ? 病理检查的手段 很多 , 如 :HE 常规检查、特殊染色 ( 组织化 学 ) 、免疫组化、原位分子杂交、聚合酶链反应 ( PCR) 、 电子显微镜检查 、病理图像分析、流式细胞仪检查、细胞 培养、传真病理学 ( telepathology) 等。 电子显微镜技术及在病理诊断上的作用 ? 一、电子显微镜技术 ? 二、诊断病理学 ? 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 ? 四、讨论 三．电子显微镜技术在病理诊断上的作用 ? （一）电镜检查起决定性作用 ? （二） 电镜检查起参考和修正作用 ? （三） 电镜检查起验正作用 三．电子显微镜技术在病理诊断上 的作用 ? （一）电镜检查起决定性作用： 电镜发现特异性超微结构 信息做出最后病理诊断。 例：男 ,39 岁 , 发现右侧颈部无痛肿物 1 年余 , 花生米大 , 取 肿物做活检。光镜 : 增大的淋巴结 , 结构紊乱 , 但仍残留滤泡 与淋巴窦 , 窦腔及淋巴索充以大量胞质丰富的嗜伊红细胞 ,