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猕猴桃属植物的遗传多样性及种质超低温保存研究 中国是猕猴桃属植物的起源和分布中心， 种质资源极为丰富， 可为猕猴桃遗 传改良和资源利用提供广泛的背景材料。 长期以来，对猕猴桃属植物的遗传多样 性尤其是 DNA水平上的遗传多样性及种质的超低温保存缺乏系统研究。 鉴于此，作者以重要分布区之一的江西猕猴桃属植物为对象， 在查清其种类、 分布及若干性状评价的基础上，进行 AFLP分析与种质超低温保存的研究。主要 结果如下： 1 江西猕猴桃属植物的分布及若干性状评价 (1) 通过野外实 地调查与查阅标本， 对江西猕猴桃属 (Actinidia) 植物的分布状况进行系统研究， 基本查清了其分布种类及规律。 结果表明，江西境内分布有猕猴桃属植物 20 种 11 变种，其中葛枣猕猴桃 (Actinidia ．polygamya(Sieb ．et Zucc．)Maxim．) 、灰毛猕猴桃 (A ．cinerascens C．F．Liang) 、楔叶猕猴桃 (A． fasciculoides var cuneata C．F．Liang) 和簇 花猕猴桃 (A．fasciculoides C．F．Liang) 为江西首次发现。依据其种类与变种 的多样性形态特征，编制了江西猕猴桃属植物分类检索表。 江西猕猴桃属植物的地理分布区域较广， 中华猕猴桃在全省各地均有分布，各种类与变种之间对气候及土壤等生态条件要求的多样性导致其地理分布的广泛性。其区系特征主要表现为：种类丰富，特有现象较明显，江西分布国有特产种 17 种，占国产该属特有种的 30.4 ％，其中有 2 种为江西特有：种间、 种内分化较强烈， 江西猕猴桃属植物的种与变种在该属 4 个组均有代表： 与邻近 地区猕猴桃属植物的关系密切，其中与福建关系最为密切。 通过对主要种与变种果实性状观测、营养成分和氨基酸含量测定， 表明江西猕猴桃属植物在果实形状、 毛被状况、果皮色泽、果肉色泽、果实风味、 果实 Vc 含量及氨基酸含量方面存在丰富的多样性。 (4) 对江西猕猴桃属植 物中的矮型 ( 赣猕 5 号 ) 和耐贮 (97-3) 中华猕猴桃特异种质资源进行了初步研究， 为其保存与利用奠定基础。 2 猕猴桃属植物的 AFLP分析 (1) 4 种经优化的猕猴桃基因组 DNA 提取方法即 CTAB区室法、 SDS区室法、 CTAB常规法、 SDS常规法均适于提取猕 猴桃嫩叶基因组 DNA。经综合对比分析，认为 CTAB区室法为猕猴桃属植物 AFLP 分析的最佳方法，其步骤简单、快捷，抽提的基因组 DNA降解少、杂质含量少， 能获得高质量的 DNA模板。 通过对所得到的 DNA模板进行 AFLP分析，获得了清晰的 DNA指纹图谱。 (2) AFLP试剂盒所提供的 64 对引物组合中筛选出扩增带信号强度一致性好、 条带分布均匀、多态性高的 4 对引物组合即 E 一从 C+M--CAC、E 一从 G+MweCTG、E AAC十 M-- 以 G和 E 一从 C+M一 CTA对 31 份称猴桃种质进行了 DNA指纹分析。 4 对引物共得到扩增位点 190 个，其中多态性位点 179 个，多态性比例为 94.2%，区分率达 100%。该 4 对引物适用于称猴桃属植物的 AFLP分析。 各种质的多态性带数存在差异，多态性带数最多的是黑蕊称猴桃 (108 条) ， 多态性比例为 60.3%; 多态性带数最少的是早鲜称猴桃 (54 条) ，其多态性比例为 30.2%。结果进一步显示，称猴桃属植物在 DNA分子水平上存在丰富的遗传多样 性。 首次运用 AFLP技术构建了 31 份称猴桃种质的 DNA指纹图谱，通过对扩增结果进行 UPGMA聚类分析，其相似系数为 0.50 一 0.85 ，表明种质之间遗传关系较远。依相似系数 0.56 的水平，将供试的 31 份称猴桃种质分为 4 个类群 : 净 果组和斑果组为一类群， 糙毛组为一类群， 星毛组为一类群， 中华称猴桃和美味 称猴桃为一类群，该结果与传统的果面毛被特征和皮孔状况的形态分类系统中组 的划分大体一致，并有按地理分布聚类的趋势。 AFLP的分子分类可弥补传统形态分类系统的不足，其分类范围更细，可为 称猴桃属植物的分类提供依据。 (4) 聚类分析表明， 称猴桃属植物矮型种质 “赣 5 号”独立于中华称猴桃种，基于 AFLP指纹，从分子水平上分析，可提升为称猴桃属中华称猴桃种内的一个变型。 3 称猴桃种质超低温保存研究 (1) 以“赣称 5 号”为试材，筛选了其离体培养的激素组合。 MS+B凡 .0+NAAo.，与 MS+BAI.砰 NAAo.l 较适于称猴桃外植体的诱导及增殖。 无菌小芽在 MS+I BA10培养基上出根率较高，根系生长正常。 (2) 称猴桃