第二十章蛋白质和核酸.ppt

2021/2/7 * （2）测定C端 a 多肽与肼反应 所有的肽键（酰胺）都与肼反应而断裂成酰肼,只有C端的氨基酸有游离的羧基,不会与肼反应成酰肼。这就是说与肼反应后仍具有游离羧基的氨基酸就是多肽C端的氨基酸。 b 羧肽酶水解法 在羧肽酶催化下,多肽链中只有C端的氨基酸能逐个断裂下来。 4、肽链的选择性断裂及鉴定 上述测定多肽结构顺序的方法,对于分子量大的多肽是不适用的。对于大分子量多肽顺序的测定,是将其多肽用不同的蛋白酶进行部分水解,使之生成二肽、三肽等碎片,再用端基分析法分析个碎片的结构,最后将各碎片在排列顺序上比较并合并,即可推出多肽中氨基酸的顺序。 2021/2/7 * 部分水解法常用的蛋白酶有: 胰蛋白酶——只水解羰基属于赖氨酸、精氨酸的肽键。 糜蛋白酶——水解羰基属于苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸的肽键。 溴化氰———只能断裂羰基属于蛋氨酸的肽键。 2021/2/7 * F.Sanger及其他工作者化了约10年时间于1953年（35岁）首先测定出牛胰岛素的氨基酸顺序,由此Sanger获得了1958年（41岁）的诺贝尔化学奖。此后,有几百种多肽和蛋白质的氨基酸顺序被测定出来,其中包括含333个氨基酸单位的甘油醛-3-磷酸酯脱氢酶。 以后F.Sanger又测定了DNA核苷酸顺序,因而他第二次（1980年62岁）获得了诺贝尔奖（同美国人伯格、 吉尔伯特共享）。两次获得诺贝尔奖的化学家是很少见的,所以说,F.Sanger是一个伟大的化学家。 2021/2/7 * 三、多肽的合成 要使各种氨基酸按一定的顺序连接起来形成多肽是一向十分复杂的化学工程,需要解决许多难题,最主要的是要解决四大问题。 1、保护-NH2或-COOH 氨基酸是多官能团化合物,在按要求形成肽键时,必须将两个官能团中的一个保护起来,留下一个去进行指定的反应,才能达到合成的目的。 对保护基的要求是:易引入,之后又易除去。 我们把保护-NH2称为代帽子,保护羧基称为穿靴子。 2021/2/7 * 2、活化反应基团（活化-NH2或-COOH） 通常是保护-NH2及-OH、-SH等,活化-COOH 3、生物活性 合成多肽必须保证氨基酸的排列顺序与天然多肽相同,并与天然多肽不论在物理、化学性质和生物活力各方面都一样,才具有意义。 我国1965年6月发表合成成功牛胰岛素的文章,生物活性1.2~70% 美国1967年发表文章 （胰岛素合成方法的改进） 前苏联1972年发表文章 （胰岛素合成方法的改进） 胰岛素是一种激素,可用于治疗糖尿病,但只能用和人体结构相近的胰岛素,如猪胰岛素,其它的则不起疗效。 2021/2/7 * 20~3 蛋 白 质 分子量在1000以上,构型复杂的多肽称为蛋白质。 一、蛋白质的分类 1、根据蛋白质的形状分为: （1）纤维蛋白质 如丝蛋白、角蛋白等; （2）球状蛋白质 如蛋清蛋白、酪蛋白、血红蛋白、γ-球代表蛋白（感冒抗体）等。 2、根据组成分: （1） 单纯蛋白质——其水解最终产物是α- 氨基酸。 （2） 结合蛋白质——α- 氨基酸 + 非蛋白质（辅基） 辅基为糖时称为糖蛋白;辅基为核酸时称为核蛋白;辅基为血红素时称为血红素蛋白等。 2021/2/7 * 3、 根据蛋白质的功能分; （1） 活性蛋白 按生理作用不同又可分为;酶、激素、抗体、收缩蛋白、运输蛋白等。 （2）非活性蛋白 担任生物的保护或支持作用的蛋白,但本身不具有生物活性的物质。例如:贮存蛋白（清蛋白、酪蛋白等）,结构蛋白（角蛋白、弹性蛋白胶原等）等等。 2021/2/7 * 二、 蛋白质的结构 各种蛋白质的特定结构,决定了各种蛋白质的特定生理功能。蛋白质种类繁多,结构极其复杂。通过长期研究确定,蛋白质的结构可分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。 1、蛋白质的一级结构 由各氨基酸按一定的排列顺序结合而形成的多肽链（50个以上氨基酸）称为蛋白质的一级结构。 对某一蛋白质,若结构顺序发生改变,则可引起疾病或死亡。例如,血红蛋白是由两条α-肽链（各为141肽）和两条β-肽链（各为146肽）四条肽链（共574肽）组成的。 在β链,N-6为谷氨酸,若换为缬氨酸,则造成红血球附聚,即由球状变成镰刀状,若得了这种病（镰刀形