基于聚多巴胺和酞菁光敏剂增强抗肿瘤活性的光响应型疗法研究.pdfVIP

摘要 摘要 癌症已经发展成为威胁人类健康的主要疾病之一，寻求安全高效的治疗方法 具有重要意义。光响应型疗法主要包括光动力疗法（Photodynamic Therapy ，PDT ） 和光热疗法（Photothermal Therapy ，PTT ），它们因良好的治疗效果和低毒副作用 引起人们的广泛关注。但二者的治疗机制差异明显，PDT 是通过光敏剂在光的参 与下生成活性氧（ROS ）造成细胞和肿瘤微血管的氧化损伤，而PTT 则是利用热 疗剂的光热转换能力实现局部高温进行热损伤。围绕光响应型疗法的治疗效率问 题，本论文依据肿瘤微环境特征，利用纳米技术，探究了基于聚多巴胺热疗剂 （Polydopamine ，PDA ）的PTT 治疗、基于锌酞菁光敏剂（Zn Phthalocyanine ， ZnPc ）的PDT 治疗以及二者的联合治疗增效策略。通过干扰细胞内还原型/氧化 型谷胱甘肽（GSH/GSSG ）氧化还原平衡、光敏剂的可控释放、扩大ROS 损伤范 围、缓解肿瘤组织乏氧及多模成像诊疗一体化等研究，为推进 PTT/PDT 联合疗 法的应用奠定了基础。本论文主要研究内容与结果如下。 1. 基于干扰细胞内 GSH/GSSG 氧化还原平衡的 PDT 治疗体系 GSH/GSSG 是细胞内氧化还原平衡的重要调节器，与细胞凋亡密切相关。破 坏谷胱甘肽氧化还原平衡会诱导细胞凋亡。肿瘤细胞内的 GSH 浓度比正常细胞 高三个数量级，GSH 的还原性会削弱 PDT 的氧化损伤程度，降低 PDT 治疗效 果。为解决该问题，本论文合成胸腺嘧啶（T ）修饰的ZnPc1 ，利用 T 与汞离子 （Hg2+ ）的配位作用（T-Hg-T ）形成纳米复合物（ZHNP ）。配位过程引发的ZnPc1 聚集显著降低其 PDT 活性。进入肿瘤细胞后，GSH 的活性基团（-SH ）会剥夺 ZHNP 中的Hg2+ ，造成GSH 浓度降低和 GSH/GSSG 稳态失衡，同时使 ZnPc1 解 聚并恢复其 PDT 活性。体外实验结果表明，Hg2+ 能够通过干扰 GSH/GSSG 平衡 抑制细胞增殖。因此，开发具有 GSH/GSSG 稳态干扰功能的光敏复合物是增强 PDT 治疗活性的有效策略。 2. 2D-PDA 高效负载 ZnPc2 纳米复合物的制备及 PTT/PDT 联合治疗体系 二维热疗剂以其稳定性好、生物安全性高、比表面积大、易与药物分子结合 等独特性质在 PTT 中展现出巨大的应用潜力。PDA 中含有具有平面取向的超分 子结构，本论文首次使用过氧化氢（H O ）氧化剥离PDA 纳米球制备了二维聚 2 2 多巴胺（2D-PDA ），其光热转换效率为27.16% 。2D-PDA 的优势在于氧化过程中 羟基含量的减少能够降低 PDA 的氧自由基清除能力，羧基的形成有效改善了 I 摘要 PDA 在水中的分散性，有利于在血液中传输。2D-PDA 对 ZnPc2 负载量达 0.495 mg mg-1 （PZNS ）。体外研究结果表明，PZNS 的PTT/PDT 联合疗法对肿瘤细胞 的增值抑制效果明显优于基于2D-PDA 的PTT 及 ZnPc2 的PDT 治疗效果。 3. 热响应型药物控释系统的构建及 PTT/PDT 联合治疗体系 通过载体将药物分子靶向递送至病灶组织处并实现可控释放，不仅可以提高 药物利用率，改善治疗效果，同时也可以减少药物的毒副作用。基于 Chargaff 规 则，本论文将修饰腺嘌呤（A ）的 PDA 纳米微球（A-PDA ）与 ZnPc1 相结合， 形成纳米复合物（PATP ）。PATP 在近红外光的作用下引起肿瘤组织局部升温，促 使 PATP 中的氢键断裂，释放出 ZnPc1 。A-PDA 的光热转换效率为 38.40%，较 2D-PDA 有较大提升。研究结果表明，基于 A-PDA 的 PTT 和 ZnPc1 的 PDT 均 表现出肿瘤细胞增值抑制效果。体内实验结果也表明 PATP （808+665 nm）实验 组具有最佳