常用缓冲溶液配制方法.docx

1.甘氨酸-盐酸缓冲液（L） X毫升mol/L甘氨酸+Y毫升mol/L HCI，再加水稀释至 200毫升 pH X Y pH X Y 50 50 50 50 50 50 50 50 甘氨酸分子量=,mol/L 甘氨酸溶液含 15.01 克 / 升。 2.邻苯二甲酸- -盐酸缓冲液（ mol/L ) X毫升mol/L 邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl，再加水稀释到20毫升 pH(20 C) X Y pH(20 C) X Y 5 5 5 5 5 5 5 5 5 邻苯二甲酸氢钾分子量 =,mol/L邻苯二甲酸氢溶液含 40.85克/升 3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 pH L NazHPQ (毫升) L 柠檬酸 （毫升） pH L NazHPQ (毫升) L 柠檬酸 （毫升）  Na2HPO分子量=,mol/L溶液为28.40克/升。 NazHPQ? 2H2O分子量=,mol/L 溶液含35.01克/升。 C4H2O7 - HO分子量=,mol/L 溶液为21.01克/升。 4 ?柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH钠离子浓度 pH 钠离子浓度 （mol/L） 柠檬酸（克） CH8G - H2O 210 210 210 210 245 285 266 氢氧化钠 盐酸（毫升） 最终体积 （克） HCl （浓） （刑① NaOH 97% 84 160 10 83 116 10 83 106 10 83 45 10 144 68 10 186 105 10 156 126 10 使用时可以每升中加入 1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化 钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（ mol/L ） pH mol/L 柠檬酸 （毫升） mol/L 柠檬酸钠 （毫升） pH mol/L 柠檬酸 （毫升） mol/L 柠檬酸钠 （毫升） 柠檬酸GHO? HO分子量，mol/L溶液为21.01克/升。 柠檬酸钠N CgH5O7 ? 2H2O.分子量， mol/L 溶液为29.41克/毫升。 6.乙酸-乙酸钠缓冲液（ mol/L ） pH（18 C） mol/L NaAc （毫升） mol/L HAc （毫升） pH（18 C） mol/L NaAc （毫升） mol/L HAc （毫升）  NazAc- 3H2O分子量=,mol/L 溶液为27.22克/升。 7 ?磷酸盐缓冲液 (1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液() pH mol/L Na2HPQ （毫升） mol/L NafPO （毫升） pH mol/L NaHPQ （毫升） mol/L NaWPQ （毫升） N@HPQ? 2HO分子量=,mol/L 溶液为85.61克/升。 NsfeHPCO- I2H2O分子量=,mol/L 溶液为克/升。 NaHPQ- 2H2Q分子量=,mol/L溶液为克/升。 磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个 pKa 值，所以用它们配制的缓冲液， pH范围最宽：NaHPQ： pKal =, pKa2=; NqHPQ： pKal =,pKa2= 配酸性缓冲液：用 NaHPQ, pH= 1?4, 配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐， pH= 6?8, 配碱性缓冲液：用 NazHPQ, pH= 10?12。 用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电 泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为 SDS十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难 溶的十二烷基硫酸钾。 磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的 pH范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后 pH变化小，如稀释10倍后pH的变化小于。 其缺点为：①易与常见的钙 Ca2+离子、镁Mg24离子以及重金属离子缔合生成沉淀；② 会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。 (2)磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液(1/15 mol/L ) pH mol/L/15Na 2HPO （毫升） mol/L 15M11.876 克 15M9.078 克 0.05M0.2M 20 C 20 C 18C 0.04M 0.04M 0.04M8.25 克 0.05M25 C 0.1M 1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 11.硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根） pH 0.05M硼砂 （毫升） 0.2M硼酸（毫 升） pH 0.05M硼砂 （毫升） 0.2M硼酸（毫 升） 硼砂NstBQ ? 10HO,分子量=;溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。 硼酸H3BO,分子量=,溶液为12.37克/升。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保