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- 2021-03-15 发布于广东
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第一节
第一课时;;人教版教学课件微生物的实验室培养;病毒;SARS病毒 禽流感病毒;朊病毒(蛋白质病毒);真菌;; 了解有关培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。;(2)按培养基的物理形态分:
液体培养基
半固体培养基
固体培养基;培养基的种类;选择培养基; 根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。
合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。
优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低
缺点: 缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。 ; 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。
优点:营养成分丰富,培养效果好
缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;;固体培养基:菌落;液体培养基:;半固体培养基:;培养基的配制原则:;微生物的五种营养要素;无机C源:CO2、碳酸盐,只能被自养微生物利用
有机C源:各种糖类,其次是有机酸、醇类、 脂类和烃类化合物
;分子态氮:固氮微生物以分子氮为唯一氮源
无机态氮:硝酸盐、铵盐几乎所有微生物能利用
有机态氮:蛋白质及其降解产物
a实验室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源
b生产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等; 构成微生物细胞的组成成分
调解微生物细胞的渗透压, PH值和氧化还原电 位
有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源
构成酶活性基的组成成分,维持酶活性。Mg、Ca、K是多种酶的激活剂
; 构成微生物细胞以C、H、O、N、P、S六种元素为主,约占细胞干重的95%以上;
Ca、K 、Mg、Fe为大量元素,以无机盐阳离子形式被吸收,配培养基要加磷酸盐、硫酸盐。
Zn、Ca、Mn、Co、Mo等微量元素,在微生物培养中有0.1PPM就可以了,自来水原料中已够用,不需另加。
;碳源、氮源、生长因子的比较;各种培养基的具体配方不同,但一般都包括哪些成分?
答:不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质。
注: 另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
;人教版教学课件微生物的实验室培养;二 无菌技术:无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。;1、灼烧灭菌:
2、干热灭菌:160-170 ℃下加热1-2h。
3、高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15-30min.;分类;常识;1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?;3.微生物实验室培养的基本操作程序;三、实验操作;1).配制:计算、称量、熔化
2).调节pH: 用3%的HCI/NaOH调节
pH 7.0--- 7.2
3).分装:分装过程中注意不要使培养基沾 在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
4).包扎:; 5).灭菌:
将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。
将培养皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃下灭菌2h。
6).倒平板:
待培养基冷却到50 ℃左右时,在酒精灯附近倒平板。2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.
7).无菌检查:
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。;倒平板:;菌种的保存;1).培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?;3).平板冷凝后,为什么要将平板倒置?;2、纯化大肠杆菌:;菌落:;菌落;霉菌的菌落特征
因种而异;;;微生物的恒温培养;微生物的恒温培养;人教版教学课件微生物的实验室培养;人教版教学课件微生物的实验室培养;问题讨论; 2).在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?;四、课题成果评价 ;本课题知识小结:;【典例解析】;例2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是:
A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌
C.培养基和发酵设备都必须灭菌
D.灭菌必须在接种前
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