第12章细胞增殖及其调控.pptVIP

第十一章 细胞增殖及其调控;细胞增殖(cell proliferation)的意义;第一节 细胞周期与细胞分裂;一、细胞周期(cell cycle)概述;1.细胞周期;1.1 细胞周期时相组成;1.2 细胞周期时间;第12章细胞增殖及其调控;2.细胞周期中不同时相及其主要事件;G1期; ·S期为DNA合成期。DNA复制与组蛋白合成同步，组成核小体串珠结构。 （1）合成组蛋白，非组蛋白在间期各时期均可合成。 （2）每一染色体含有两个染色单体。 （3）S期检验点：DNA复制是否完成？;·DNA复制完成，细胞即进入G2期。 G2/M期检验点：检查DNA是否受损，细胞是否已生长到合适大小，环境因素是否利于细胞分裂等。所有因素都满足，细胞才能顺利实现从G2期向M期的转化。;M 期;;3.细胞周期长短测定;原理：是对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用放射自显影技术显示标记细胞，通过统计标记有丝分裂细胞百分数的办法来测定细胞周期(3H-TdR）。 优点：可以测定细胞周期的总时间和各阶段的时间，结果明了易分析； 缺点：操作技术有一定的难度；具有一定的危险性；同位素的放射性逐渐衰减，误差较大。;细胞周期各阶段的时间与PLM的关系 ;◆流式细胞仪测定法(Flow Cytometry) G1: 1N ; G2/S：2N ; S: 介于1N和2N之间 监测DAN含量的变化;二、有丝分裂(mitosis);前期(prophase);;前中期(prometaphase);中期(metaphase); 牵拉学说、外推学说; .;后期(anaphase) ;;末期(telophase);三、胞质分裂(Cytokinesis);动物细胞胞质分裂;植物细胞胞质分裂;第二节 细胞周期的调控(Cell-Cycle Control);一、研究背景;PCC;爪蟾卵母细胞的成熟过程;MPF的发现; 裂殖酵母的cdc2基因，是第一个被分离出来的cdc基因, cdc(cell division cycle)基因：控制细胞周期启动和各时相的转换。;CDK(cyclin-dependent kinase);三、周期蛋白 含量随细胞周期进程变化而变化的特殊的蛋白质，各类周期蛋白均含有一段约100个氨基酸的保守序列，称为周期蛋白框，介导周期蛋白与CDK结合，不同的周期蛋白框识别不同的CDK，组成不同的周期蛋白复合体，表现不同的CDK激酶活性。 ;;周期蛋白分子结构特征;周期蛋白激酶;（一）G2/M期转化与CDK1激酶的调控作用 CDK1激酶（p34cdc2激酶），由p34cdc2蛋白（或p34cdc28蛋白???与周期蛋白B组成。;CyclinB-CDK1复合物随CyclinB浓度变化而变化; CDK1激酶催化不同的底物（主要是磷酸化丝氨酸和苏氨酸），参与细胞的多种功能。;细胞中CDK激酶的活性受到多种因素的调控;4.2 CDK1的调节与活化 ;G1期，在生长因子的刺激下，cyclin D表达，并与CDK4、CDK6结合，使下游的蛋白质如Rb磷酸化，Rb释放出转录因子E2F，促进许多基因的转录，如编码cyclinE、A和CDK1的基因。 G1-S期，cyclinE与CDK2结合，促进细胞进入S期。 在中期当MPF活性达到最高时，激活后期促进因子APC，将泛素连接在cyclinB上，cyclinB被蛋白酶体(proteasome)降解，完成一个细胞周期。 ;细胞周期运转的阻遏(细胞周期运转的负调控);第12章细胞增殖及其调控;本章内容到此结束，谢谢大家！！