我校新开教学实验“荷包牡丹碱的分离纯化”的设计.docxVIP

我校新开教学实验“荷包牡丹碱的分离纯化”的设 计 [] Chemistry of natural medicine is an important compulsory course for pharmaceutical specialty and the corresponding experiment course is also very important. A new teaching experiment for chemistry of natural medicine ― isolation and purificatio n of dicentrine is developed in School of Chemical Science and Technology ， Yunnan University. In this experiment ，pure dicentrine can be obtained from Stephania epigaea according to methanol ultrasonic extraction ， silica gel column chromatography ， and methanol recrystallization. This experiment is convenient ， effective ， and suitable to be a teaching experiment for the undergraduate of pharmaceutical engineering. 天然药物化学是制药工程专业一门重要的专业必修课程， 主 要研究天然药物主要有效成分的结构类型、 生源途径、理化性质、 提取分离及结构鉴定等 [1] 。天然药物化学实验课程是为了更好 地掌握天然药物化学理论课程的教学内容， 配套设计的各类化合 物的提取分离和结构表征实验， 是天然药化理论知识和实际操作 的纽带，通过该实验课程能够更好地培养学生的实际操作能力和 创新能力 [2] 。从传统中药或者药用植物中提取分离天然活性成 分，不仅可以解决很多活性化合物的来源以供活性筛选或药用开 发，而且可以推进中药的现代化和国际化 [3] 。因而，进行天然 活性化合物的提取分离工艺研究， 并应用于天然药物化学实验教 学不仅具有很好的实用性， 而且还能够调动学生的实验兴趣和学 习积极性，培养学生勇于创新的精神。 实验研究对象的选择 云南大学化学科学与工程学院制药工程实验教学团队在设 计教学试验时注重实用性， 力求在传统实验教学中结合云南省地 方特色，开发新的适合制药工程专业的天然产物化学教学实验。 地不容 ( Stephania epigaea )是云南著名的传统中草药 (图 1)， 味苦而辛，性凉，有小毒，功能清热解毒、 镇静、理气、止痛[4] 。 来自于防己科(Menispermaceae)千金藤属植物，生长于湿热河 谷的石灰岩上，俗名山乌龟、地胆、金不换等。在植物分类学上 属千金藤属山乌龟亚属，资源较为丰富 [5-6] 。研究表明，地不 容中荷包牡丹碱的含量极高，荷包牡丹碱( dicentrine )属于异 喹啉类阿朴菲生物碱(图 1)，属于天然药物化学教学内容中的 一类典型生物碱，具有镇痛、镇静、抗癌 [7-8] 、肠道平滑肌解 痉[9] 、抗菌 [10] 及抑制肿瘤细胞生长的作用 [11-12] 。荷包牡丹 碱的商品名为痛可宁，用于头痛、牙痛、小手术后疼痛及神经衰 弱等。文献调研未见关于荷包牡丹碱提取工艺的研究， 将地不容 中荷包牡丹碱的提取工艺应用于本科教学， 具有较好的云南地方 特色，有利于提高学生对天然药物化学的学习兴趣。 实验方案的设计 经过大量的前期研究， 筛选了不同的提取方法、 柱层析条件 和重结晶条件等， 结合教学实验的条件和要求， 最终确定了以下 实验方案： 荷包牡丹碱的提取 取地不容药材粉末 50 g ，采用甲醇超声提取 3 次，每次使 用甲醇200 mL,每次超声30 min。抽滤，合并甲醇提取液，减 压浓缩回收甲醇得到粗提物。 荷包牡丹碱的分离 首先是拌样：取以上粗提物采用甲醇溶解进行拌样，硅胶 （100?200目）用量为5.0 g,样品拌至完全干燥备用。然后是 湿法装柱：硅胶用量为 40 g，采用石油醚150 mL进行分散，装 入5 cmx 30 cm的层析柱，把石油醚放至液面高出硅胶面 2 cm 左右（放出石油醚经重蒸后可回收用于柱层析）,静置 30 min 使层析柱自然压紧。 此时把拌好的硅胶通过漏斗缓慢加入层析柱 中，放干溶液。最后开始柱层析：采用石油醚 -丙酮（4： 1） 200 mL进行洗脱，弃去此部分洗脱液，继续用石油醚 -丙酮-二乙胺 （