第十一章-固相膜免疫测定.pptVIP

2021/3/26 * 免 疫 印 迹 法 2021/3/26 * 2021/3/26 * （三）方法学评价: 1、特异性强 2、吸附蛋白能力强 3、可同时检测多种抗体 4、膜条的重复检测应用 2021/3/26 * 第六节 影响固相膜免疫试验的主要因素 一 试剂方面 二 标本方面 三 实验过程 第七节 固相膜免疫分析技术的临床应用 激素、自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤、心血管疾病、过敏原和毒品。 2021/3/26 * 1.HRP催化的反应式为DH2+H2O2→D+2H2O,何者习惯上被称为底物 ( ) A.DH2 B.H2O2 C.D D.H2O 2.OPD经与HRP反应后,再用H2SO4终止反应后呈 ( ) A.橙黄色 B.棕黄色 C.黄色 D.蓝色 3、目前ELISA中应用最广泛的底物是 A.OPD B.TMB C.5-ASA D.ABTS （ ） A B B 2021/3/26 * 4.ELISA双抗体夹心法是 ( ) A.酶标记特异抗体用于抗原的检测B.先将待测抗原包被于固相载体C.标记一种抗体可检测多种抗原D.能用于半抗原的测定E.属竞争结合测定 5.捕获法主要用于何种物质的测定 A.IgM B.IgG C.IgA D.IgD ( ) A A 2021/3/26 * 6、下列哪种方法用一种标记物可检测多种被测物 ( ) A.ELISA双抗体夹心法 B.ELISA竞争法C.ELISA间接法 D.ELISA捕获法E.放射免疫测定法 7.关于ELISA竟争法,正确的是 ( ) A.用于检测抗原 B.被测物与酶标记物的免疫活性各不相同 C.被测物多则标记物被结合的机会少 D.待测管的颜色比参照管的淡表示被测物量少 E.结合于固相的酶标抗原量与样品中被测抗原量成正比 C C 2021/3/26 * 1.每个亲和素能结合多少个分子的生物素A.1 B.2 C.3 D.4 2.生物素分子中与亲和素结合的主要部位是 ( ) A.噻吩环 B.咪唑酮环 C.苯环 D.羰基 E.-NH- 3.在用生物素标记酶时,酶活性会降低的是A.HRP B.葡萄糖氧化酶 C.β-Gal D.AP ( ) B D 2021/3/26 * 第十一章 固相膜免疫分析技术 2021/3/26 * 掌握:免疫印迹试验 熟悉:胶体金免疫技术的方法学种类与原理 了解:胶体金与免疫金的制备、其他膜载体免疫分析技术 2021/3/26 * 一 概述 二 免疫层析试验 三 免疫渗滤试验 四 斑点酶联免疫吸附试验 五 免疫印迹试验 六 影响固相膜免疫试验的主要因素 七 固相膜免疫分析技术的临床应用 2021/3/26 * 概述 固相膜免疫分析技术 (solid phase membrane-based immunoassay) 特点:以微孔膜作为固相载体 多孔性, 非共价键高度吸附抗原或抗体 易于漂洗 2021/3/26 * 第二节 免疫层析试验 免疫层析试验原理: 以NC膜等为固相载体,样品溶液借助毛细作用在层析条上泳动,同时样品中的待测物与层析材料上待测物的受体（抗原或抗体）发生高特异性、高亲和性的免疫反应,层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域,通过目测或仪器检测标记物,在短时间内得到直观的实验结果。 2021/3/26 * 毛细作用 是指浸润液体在细管里升高的现象和不浸润液体在细管里降低的现象 2021/3/26 * 第二节 免疫层析试验 免疫层析试验分为: 胶体金免疫层析试验（ICA） 荧光免疫层析试验（GICA） 2021/3/26 * 二、 测定模式（一）胶体金免疫层析试验 1、双抗体夹心法测抗原 2、竞争法测小分子抗原 3、间接法测抗体 2021/3/26 * 胶体金免疫层析试验 A G C B 双抗体夹心法测大分子抗原 （阳性,2个条带） 2021/3/26 * 胶体金免疫层析试验 A G C B 竞争法测小分子抗原（阴性,2个条带） 2021/3/26 * 三 技术要点 操作要点: （1）将试剂条标记线一端