DNA甲基化实用课件 PPT.pptVIP

DNA甲基化生物学作用 IAP: intracisternal A particle 去甲基化：灰鼠基因（agouti）仅微量表达 甲基化：基因超量表达 X染色体的失活（X-inactivation ） 生长发育过程中，雌性哺乳类动物细胞中的两条X染色体其中一条失去活性的现象。 避免因拥有两条X染色体而产生 双倍的基因产物，保持和雄性动物 X染色体数量及功能上的一致性。 X染色体上存在一个与X染色体失活有密切联系的核心部位。核心区命名位X染色体失活中心（X-chormosome inactivation center，Xic），其定位在人Xq13区（Barr氏小体浓缩部位）。 研究发现失活的染色体上DNA序列都呈高度甲基化，导致绝大多数基因转录处于关闭状态。 X-chromosome inactivation 雌性家猫的一条X染色体完全失去活性 Rainbow Copy Cat Allie X染色体失活 影响DNA methylation的调控因素 DNA 甲基转移酶(DNMT)的活性 哺乳动物体内有三种DNA 甲基化转移酶：Dnmt1、Dnmt3a 和Dnmt3b。 DNMT1--- 持续性DNA 甲基转移酶；与甲基化相关，缺乏引起基因组低甲基化，染色体缺失、重排、突变畸形 DNMT3a、DNMT3b--- 从头甲基转移酶；与去甲基化相关，在胚胎干细胞和早期胚胎中高度表达，缺乏引起胚胎死亡，在肿瘤组织中广泛高表达 SCIENCE VOL 300 18 APRIL 2003 正常小鼠 (Dnmt1 +/+) —— 阳性对照 DNM1酶缺乏小鼠模型 (Dnmt1 chip/–) —— 实验组 Embryonic stem (ES) 细胞 (Dnmt1 –/–) —— 阴性对照 Dnmt1 chip/–小鼠Dnmt1酶的表达量明显减少，大约为正常小鼠的10% Dnmt1 chip/–小鼠体重仅为正常小鼠66% 80%的小鼠在4-8个月内产生T细胞性淋巴瘤 c-myc癌基因在Dnmt1 chip/–小鼠中异常高表达 影响DNA methylation的调控因素 组蛋白的甲基化 真核生物的组蛋白N 末端或C 末端氨基酸残基可生乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等共价修饰，并影响基因转录。 H3K9 的甲基化与DNA 的甲基化在基因的沉默机制中具有协同作用 H3K4 的甲基化拮抗DNA 甲基化所产生的基因沉默 影响DNA methylation的调控因素 RNA 干扰 一般认为RNA 干扰( RNAi) 是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象 —— 翻译、转录后水平 siRNA 指导DNA 甲基化(RdDM) 现象证实：siRNA 可以通过DNA 甲基转移酶Dnmt1和Dnmt3b介导DNA 甲基化—— DNA水平 DNA methylation and Oncology 正常生物DNA甲基化 DNA甲基化始发于胚胎早期，随着组织细胞分化发育，基因组DNA经历了去甲基化、区域性的重新甲基化以及组织特异基因选择性的去甲基化的过程。最后，这种DNA甲基化模式就相对稳定下来。 肿瘤组织的DNA甲基化 肿瘤中普遍存在DNA甲基化状态的改变，其特点是总体的甲基化水平降低与局部的甲基化水平升高。 低甲基化可诱导原癌基因和转座子成分活化，基因印迹缺失以及染色体不稳定性增加，最终诱发肿瘤 在整体低甲基化的水平下，某些抑癌基因发生高甲基化，导致基因沉默，对肿瘤抑制能力低下 DNA甲基化与肿瘤的关系 肿瘤细胞的特征： 癌基因低甲基化 ——被激活； 抑癌基因高甲基化 ——被沉默 甲基化水平与肿瘤生物学特性密切相关，DNA甲基化水平越低，染色体越容易发生功能异常，肿瘤的浸润能力就越高，临床分期也愈晚 Company Logo 标题文字内容 Click here to add Title DNA甲基化 明星熊猫——“滚滚” 为什么熊猫是黑白的？ —— 基因决定命运 1942年，Conrad Hal Waddington 提出表观遗传学( Epigenetics)的概念，以此解释物种的内在基因与外观表现之间的关系。 基因序列(Genotype)的改变可能导致功能及表型(Phenotype)的改变。 基因型通过一些“偶然的、不确定的机制”决定了不同的表型。 —— 生物的不同特征完全随机获得 Waddingtons epigenetics 基因型 表型 Waddingtons epigenetics 基因型 表型 DNA双螺旋 基因的结构 基因表达受多种因素调