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主要分离模式
毛细管电泳最基本、应用最广的一种操作模式,其分离原理是基于试样组分荷质比差异。
需要控制的操作变量主要是电压、缓冲液浓度、pH值和添加剂等。
在CZE中,除了背景电解质外,常在缓冲溶液中加入某些添加剂:中性盐 、表面活性剂 、手性添加剂 。
毛细管区带电泳(CZE)
主要分离模式
CZE在3分钟内分离30种阴离子电泳图
毛细管区带电泳(CZE)
主要分离模式
在电泳缓冲溶液中加入表面活性剂,当溶液中表面活性剂浓度超过临界胶束浓度时,表面活性剂分子之间的疏水基团聚集在一起形成胶束,成为分离体系的准固定相,溶质基于在水相和胶束相之间的分配系数不同而得到分离。
胶束电动毛细管色谱(MEKC)
主要分离模式
胶束电动毛细管色谱(MEKC)
毛细管电泳仪
毛细管电泳仪
进样方法
(一)电动力学进样
称为电迁移进样,可完全实现自动化操作,是商品仪器必备的进样方式。电动进样对离子组分存在偏差。
(二)流体力学进样
称为压力进样,流体力学进样没有组分偏差,进样量几乎与试样基质无关,是最常用的进样方法。
(三)扩散进样
利用浓度差扩散原理将试样分子引入毛细管内。
检测方法
HPCE常用检测器性能比较
检测方法
检测限(mol)
优缺点
是否
柱上检测
紫外
10−13~10−16
适合于有紫外吸收化合物
是
荧光
10−15~10−17
灵敏度高,通常需衍生化
是
激光诱导荧光
10−20~10−21
灵敏度非常高,通常需衍生化
是
质谱
10−16~10−17
通用性好,能通过结构信息
否
安培
10−19~10−21
灵敏度高,只适合于电活性物质
否
电导
10−16~10−15
通用性好
否
影响电渗流的因素
分离电场
温度
pH
缓冲溶液溶剂
离子强度
添加剂
管壁涂层等。
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