实验核医学第四章.pptVIP

第四章 放射性核素标记化合物;第一节 基本概念;4.同位素标记──各种化合物上的元素被该种元素的放射性同位素所取代的标记。 5.非同位素标记──利用性质接近的放射性核素代替需标记化合物上的元素的标记。 6.定位标记──把放射性核素标记到化合物指定位置上的标记。 7.非定位标记──无法确定放射性核素标记到化合物上的某部位的标记。 全标记（一般标记）──标记化合物上原子被取代的机会均等的标记。 准定位标记──在定位标记时，由于中间过程，可能也标记在其它位置上的标记。;第二节 标记化合物的制备;二、考虑因素 1.原材料及其价格； 2.标记物的稳定性； 3.微量操作技术； 4.冷试验； 5.防护措施及防污染、废物处理方案。;三、基本方法 1.同位素交换法：某一放射性核素或其化合物与待标记化合物中相同元素的非放射性核素进行交换反应。 2.化学合成法：应用放射性核素的原原料，通过各种化学反应，将放射性核素合成到待标记化合物的特定位置上。 3.生物合成法：全生物合成──利用生物的生理代谢作用，将简单的放射性原料转化成所需的标记物； 酶促合成──利用酶的生物活性，将放射性前体转变为所需的标记物。 4.络合物/鳌合物生成法：将放射性金属离子和具有特定功能的化合物进行络合或鳌合反应。利用了金属离子易生成络合物或鳌合物的原理。;第三节 常用标记化合物的制备;一、14C标记化合物的制备 C的主要同位素 14C的特点： 1.半衰期长； 2.发射的β-射线能量低，可用液闪测量，易防护； 3.用于自显影，影像清晰； 4.14C的化合物较稳定，辐射自分解速度慢。;（一）14C标记化合物的化学合成 起始原料：Ba14CO3或14CO2 中间体：由原料经一步或两步反应制得简单14C标记物 ;例1：制备14C标记的维生素K2;例2：[1-14C]-乙酸的制备 方法1： 方法2：;核素标记的位置一般根据实验目的而选择。 例3： 例4： β-14C-丝氨酸 14C-甲酸 甘氨酸;化学合成法的优点： 能定位标记； 纯化较容易； 放射性比活度高。 缺点： 需特定的原料或中间体； 需特殊的微量操作和射线防护技术； 合成步骤较多，对复杂化合物的标记有困难。;（二）14C标记化合物的生物合成 1.全生物合成 采用一些低等生物，如细菌、绿藻、酵母等，利用它们的代谢活泼，繁殖迅速，可把简单的放射性原料（如14CO2）掺入到细胞内，再进一步处理得到所需标记物。 ;特点： 方法简单； 可制得结构复杂化合物； 保留化合物天然生物活性和天然构型。 缺点： 无法控制定位； 分离纯化较难； 标记率较低。;2.酶促合成 利用特定的酶，通过一步或几步反应，将标记前身物转化为所需的标记产物。 2-14C-胸腺嘧啶 尿嘧啶核苷 2-14C-胸腺嘧啶核苷 尿嘧啶 特点：定位标记，可得生物活性、光学构型的标记物 缺点：需有相应的前体和合适的酶;二、氚标记化合物的制备 氢的同位素 优点： 1.来源丰富，测量简便； 2.能量弱，射程短，无需特别防护； 3.可获高分辨率自显影效果，可观察亚细胞形态； 4.制备较简单，可获高比活度产物，灵敏度高； 5.半衰期长，易运输、贮存、安排实验。;缺点： 1.3H在分子中易丢失； 2.高比活度产物易发生辐射自分解； 3.标记物与非标记物质量相差大，标记位置可能会影响反应速率。 同位素效应：因同位素的原子质量不同而引起反应速率改变的现象。 标记位置远离反应部位，可减少同位素效应。 常用标记方法： 同位素交换法 化学合成法 生物合成法;（一）同位素交换法 RH+T2?RT+HT 操作简单，但氚常标在不稳定位置，难于定位，产品比活度低，较难纯化。 1.氚气曝射交换法： 将待标记物均匀途布在反应容器中，减压真空，通入纯氚气，密闭反应数日～数周，回收氚气，纯化标记物。一般适用于结构复杂化合物（中药有效成分）的标记。 提高比活度，缩短反应时间： ①活化氚气，将氚分子解离为氚原子或氚离子； ②尽可能分散待标记样品，扩大反应接触面； ③加入催化剂，如钯黑或铂黑。;缺点：①不定位； ②氚的利用率低；