信号通路在儿童过敏性紫癜细胞失衡中的作用.docxVIP

目 目 录 1 IL-6／STAT3、IL-2／STAT5信号通路在儿童过敏性紫癜 Thl7／Treg细胞失衡中的作用 l 1．1 中文摘要 1 1．2 英文摘要 4 1．3 前言 7 1．4材料与方法 15 1．5 结果 27 1．6 讨论 · ·· 42 1．7 结论 52 1．8 参考文献 53 1．9英汉缩略词对照表 64 2 致谢 · 一66 3 Thl7细胞／调节性T细胞失衡在过敏性紫癜发病机制中的 作用(综述) 67 万方数据 四川医科大学硕士学位论文I 四川医科大学硕士学位论文 I L-6／STAT3、I L-2／STAT5信号通路在儿童过敏性紫癜 Thl 7／Treg细胞失衡中的作用 摘要 目的：本研究旨在1)探讨Thl7细胞／CD4+CD25+调节性T细胞 (regulatory T cell，Treg)失衡在儿童过敏性紫癜(Henoch—Schonlein purpura，HSP)发病机制中的作用；2)探讨IL-6／STAT3(信号转导 和转录激活子3，STAT3)、工L一2／STAT5(信号转导和转录激活子 5，STAT5)信号通路对Thl7／Treg细胞失衡的调节作用；3)探讨血清 细胞因子IL一17A、IL一6、TGF—B。、IL一2在HSP急性期的变化及其对 Thl7／Treg细胞失衡影响的可能机制；4)为进一步阐明Thl7／Treg 细胞失衡的分子机制之一提供实验依据。方法：研究对象为2013年 3月一2014年4月我院儿科诊治的初次发病的HSP急性期患儿50例， 以及同期来我院体检的健康儿童50例作为对照组。用流式细胞技术 检测外周血T淋巴细胞中Thl7细胞和Treg细胞的表达水平，用SYBR Green I实时荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞(PBMC) STAT3mRNA、STAT5mRNA的表达水平；用双抗体夹心ABC—ELISA技术 检测血清工L一17A、IL一6、TGF—B。、IL一2的浓度。结果：HSP组外周 血T淋巴细胞中Thl7细胞水平(3．34±0．60％)较对照组(0．90± 0．28％)明显增高(PO．01)，而Treg细胞水平(4．21±1．25)较对 照组(6．90±1．23)则明显降低(P0．01)；HSP组STAT3mRNA的相 对表达水平为1．92±O．61较对照组1．28±0．63明显增高(PO．01)， 而STAT5mRNA在HSP组中的表达水平1．23±0．64则明显低于对照组 万方数据 四川医科大学硕士学位论文的1．90±0．56(P0．01)；HSP组血清工L一17A(45．09±12．99pg／m1)、 四川医科大学硕士学位论文 的1．90±0．56(P0．01)；HSP组血清工L一17A(45．09±12．99pg／m1)、 TGF—B。(321．55±81．05pg／m1)、IL一6(83．75±29．91pg／m1)水平 较对照组IL一17A(21．80±11．76pg／m1)、TGF-B。(239．84± 66．04pg／m1)、IL一6(37．30±12．86pg／m1)水平显著增高，而HSP 组血清IL一2(27．61±14．51pg／m1)水平较对照组IL-2(38．51± 12．86pg／m1)水平则明显降低(PO．01)：在HSP组，Thl7细胞的 表达水平与IL一17A、IL一6、STAT3mRNA的表达水平均呈正相关，相关 系数分别为0．945(PO．01)、0．864(PO．01)、0．912(PO．01)； Treg细胞的表达水平与IL一2、STAT5 mRNA表达水平呈正相关，相关 系数分别为0．967(P0．01)、0．969(P0．01)。结论：HSP急性 期的患儿Thl7细胞水平增高，Treg细胞水平降低，即存在Thl7／Treg 细胞失衡；HSP急性期的患儿存在IL-6／STAT3信号通路激活，且Thl7 细胞的表达水平与IL-6、STAT3mRNA的表达水平均呈正相关，提示 IL一6／STAT3信号通路激活参与了HSP发病，Thl7细胞增殖、活化与 工L一6／STAT3信号通路激活有关，而IL一2／STAT5信号通路活性下调， 且Treg细胞的表达水平与IL一2、STAT5 mRNA表达水平呈正相关，提 示Treg细胞的表达下调与IL一2／STAT5信号通路活性下调有关。Thl 7 细胞高表达导致过度免疫炎症反应，Treg细胞低表达，其免疫抑制 功能不足，两者共同作用最终引起全身广泛性小血管炎可能是HSP重 要的发病机制之一；HSP急性期患儿血清IL一17A、工L一6、TGF—B。表 达水平上调，IL-2表达水平下调，提示细胞因子IL-17A、IL-6、TGF- B。和IL一2可能通