第八章第二节沙门氏菌剖析.pptVIP

第八章第二节沙门氏菌剖析 病鸡出现跛行或卧地不起 第八章 肠杆菌科 附 鸡白痢 有时可引起全眼球炎，角膜混浊呈云雾状 第八章 肠杆菌科 附 鸡白痢 成年鸡感染时，常无明显症状，有时可见精神沉郁，食欲减退， 鸡冠萎缩、乌紫 第八章 肠杆菌科 附 鸡白痢 产蛋率下降，蛋品质下降，可见 薄壳蛋、白壳蛋，破损率增加 第八章 肠杆菌科 附 鸡白痢 六、抵抗力 沙门氏菌对外界环境有中等程度的抵抗力，对常用消毒药的常用浓度比较敏感，如5%的石炭酸溶液、70%的酒精可在数分钟之内将其杀死。本菌对低温较有耐力，在25℃中能生存10个月左右。在潮湿温暖处的生存期不超过4～5周，在干燥的垫草中可存活8～20周。 第八章 肠杆菌科 第二节 沙门氏菌属 六 抵抗力 七、微生物学检验 本菌的检验主要靠分离培养、生化试验及血清学鉴定。 对末污染的检材可直接在鉴别培养基平板上划线分离，经37℃24小时培养后，便能一次获得纯培养。已污染的检材，则需要增菌培养后再行分离。 第八章 肠杆菌科 第二节 沙门氏菌属 七 微生物学检验 增菌培养基常用亚硒酸盐煌绿增菌液。这种培养基能抑制检材中其他杂菌生长，而使沙门氏菌大量增殖。接种量为培养基量的1/10。接种后37℃培养16～18小时，取增菌培养物在鉴别培养基上划线分离，培养24小时，如末发现疑似本菌菌落，则需从已培养48小时的增菌物中重新划线分离一次。 鉴别培养基常用S.S琼脂、伊红美蓝琼脂、远藤氏琼脂、亚硫酸秘琼脂等。它们能抑制杂菌生长。绝大多数沙门氏菌因不发酵乳糖，在这类平板上所形成菌落的颜色与大肠杆菌不同。如在增菌培养的同时，又直接在鉴别培养基上作浓厚涂布或划线分离，也可能有一次获得纯培养的机会。 挑取鉴别培养基上的可疑菌落作纯培养，并同时在三糖铁斜面划线和底层穿刺，37℃培养24小时后，沙门氏菌在底层呈黄色，如产生硫化氢则呈现黑色，在斜面上仍为红色，大肠杆菌则整个培养基变黄，底层无黑色。 第八章 肠杆菌科 第二节 沙门氏菌属 七 微生物学检验 S.S.琼脂平板 伊红美蓝琼脂平板 第八章 肠杆菌科 第二节 沙门氏菌属 七 微生物学检验 伤寒沙门菌在SS琼脂平板上的菌落特征 第八章 肠杆菌科 第二节 沙门氏菌属 七 微生物学检验 SS平板 沙门氏菌有黑色中心，如果没有黑色中心，就很可能是志贺氏菌了。 第八章 肠杆菌科 第二节 沙门氏菌属 七 微生物学检验 将疑为沙门氏菌的培养物用革兰氏染色、镜检，并作尿素酶、V一P、MR、吲哚、柠檬酸盐利用及糖发酵等试验，以鉴定其生化特性，并作出判断。同时可将三糖铁培养基上的被检细菌与A一E群多价抗0血清作玻板凝集试验以验证其是否属于A一E群沙门氏菌。 如需进一步鉴定其血清型，则应用分群抗0血清作凝集试验判定其群别。然后根据情况使用各种单因子抗0血清来测定其0抗原，查沙门氏菌抗原表，取可能的第一及第二相抗H血清以测定其单项H抗原。再用含有该相抗H血清的半固体培养基作U形管培养基，在一端接种被检菌，经培养后于另一端蘸取培养物作成纯培养，就得到有 另一相鞭毛抗原的菌种，然后用抗H单因子血清测出另一相鞭毛抗原。至此，便可鉴 定出被检菌的血清型。沙门氏菌的分离与鉴定步骤表解如下： 第八章 肠杆菌科 第二节 沙门氏菌属 七 微生物学检验 甲基红（MR）试验 某些细菌如大肠杆菌可分解葡萄糖产生丙酮酸，进一步分解产生甲酸、乙酸、乳酸和琥珀酸等混合酸，使培养基pH值降至4.4以下，此时加入甲基红指示剂呈现红色（甲基红试验阳性）（甲基红变色范围为pH4.4红色～6.2黄色）； 有的细菌（如产气杆菌）分解葡萄糖产生中性的醇、酮和醛等，使培养基pH值在5.4以上，此时若加入甲基红指示剂则呈现橘黄色（甲基红试验阴性）。 第八章 肠杆菌科 第二节 沙门氏菌属 七 微生物学检验 葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 甲基红- 葡萄糖→丙酮酸 甲基红+ 第八章 肠杆菌科 第二节 沙门氏菌属 七 微生物学检验 V－P试验 有些细菌（如产气杆菌）能分解葡萄糖产生丙酮酸，再将丙酮酸脱羧形成乙酰甲基甲醇，乙酰甲基甲醇在碱性条件下被氧化为二乙酰，二乙酰与培养基蛋白胨中的精氨酸等所含的胍基结合，形成红色的化合物。 第八章 肠杆菌科 第二节 沙门氏菌属 七 微生物学检验 葡萄糖→丙酮酸 ※乙酰甲基甲醇（－） 葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 氧化 二乙酰