生物化学:第二章 蛋白质的化学.pptVIP

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(三)蛋白质的变性、沉淀和凝固 * 蛋白质的变性(denaturation) 在某些物理和化学因素作用下,其特定的空间构象被破坏,也即有序的空间结构变成无序的空间结构,从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。 造成变性的因素 如加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等 。 变性的本质 —— 破坏非共价键和二硫键,不改变蛋白质的一级结构。 应用举例 临床医学上,变性因素常被应用来消毒及灭菌。 此外, 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂(如疫苗等)的必要条件。 若蛋白质变性程度较轻,去除变性因素后,蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能,称为复性(renaturation) 。 天然状态,有催化活性 尿素、 β-巯基乙醇 去除尿素、 β-巯基乙醇 非折叠状态,无活性 蛋白质沉淀 在一定条件下,蛋白疏水侧链暴露在外,肽链融会相互缠绕继而聚集,因而从溶液中析出。 变性的蛋白质易于沉淀,有时蛋白质发生沉淀,但并不变性。 蛋白质的凝固: 蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固的凝块,此凝块不易再溶于强酸和强碱中。 (四)蛋白质的紫外吸收 由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,因此在280nm波长处有特征性吸收峰。蛋白质的OD280与其浓度呈正比关系,因此可作蛋白质定量测定。 练习题: 肽键是由一个氨基酸的α-碳原子上的 与另一个氨基酸α-碳原子上 ,脱去一分子水形成的,它是蛋白质分子中的基本结构键。 蛋白质一级结构指的是组成蛋白质的多肽链中 的排列顺序,其主要化学键是 。 各种蛋白质的含氮量很接近,平均为 。 碱性氨基酸包括为 、 和 。 练习题: 蛋白质二级结构是指多肽链的 链原子在空间的局部排列方式,其主要形式有 、 、 和 ;维持蛋白质二级结构的主要化学键是 。 蛋白质分子构象的结构单元是 。 亚基出现在蛋白质的 级结构中。 1.下列氨基酸除什么氨基酸外都有旋光性 A.丙氨酸 B.甘氨酸 C.亮氨酸 D.丝氨酸 E.缬氨酸 2. 蛋白质是两性电解质,当其带负电荷时,溶液的pH为 A.酸 B.碱 C.pH=pI D.pHpI E.pHpI 3.蛋白质高级结构取决于 A.蛋白质肽链中的氢键 B.蛋白质肽链中的肽键 C.蛋白质肽链中氨基酸组成和顺序 D.蛋白质肽链中的肽键平面 E.蛋白质肽链中的肽单位 4. 蛋白质紫外吸收的最大波长是 A.290nm B.280nm C.270nm D.260nm E.250nm 5. 蛋白质变性不包括: A.氢键断裂 B.肽键断裂 C.疏水键断裂 D.盐键断裂 E.二硫键断裂 6. 蛋白质分子中的α-螺旋和β-折叠都是 A.一级结构 B.二级结构 C. 三级结构 D.四级结构 E..高级结构 7.亚基出现在蛋白质的 A.一级结构 B.二级结构 C.三级结构 D.四级结构 E.空间结构 * (三)结构域 多肽链在超二级结构基础上组装而成的相对独立的三维实体,称为结构域(domain) 。每个结构域具有特定的功能。 免疫球蛋白的12个结构域 对于较小的蛋白质分子来说,结构域和三级结构往往是一个意思,即单结构域的。大的蛋白质分子可以由2个或更多个结构域组成。 (四)蛋白质的三级结构 疏水键、氢键和 盐键等。 主要的化学键 整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。即肽链中所有原子在三维空间的排布位置。 定义 肌红蛋白(Mb) N 端 C端 胰岛素分子的三级结构 溶菌酶分子的三级结构 亚基之间的结合力主要是疏水作用,其次是氢键和离子键。 (五)蛋白质的四级结构 蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用,称为蛋白质的四级结构。 有些蛋白质分子含有二条或多条多肽链,每一条多肽链都有完整的三级结构,称为蛋白质的亚基 。 血红蛋白的四级结构 蛋白质的分子结构小结 第四节 蛋白质的结构与

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