单细胞成像技术设备.ppt

包括细胞阵列的培养、束缚、独立转染和荧光标记、以及独立微环境控制。对特定单细胞具备高精度动态多模态观察能力，包括单分子动态成像、精细结构超高分辨率三维成像及化学组分无标记动态定量成像，时空分辨率分别达到几秒和几十纳米。配套以相应的单细胞组学样品制备能力 * 包括细胞阵列的培养、束缚、独立转染和荧光标记、以及独立微环境控制。对特定单细胞具备高精度动态多模态观察能力，包括单分子动态成像、精细结构超高分辨率三维成像及化学组分无标记动态定量成像，时空分辨率分别达到几秒和几十纳米。配套以相应的单细胞组学样品制备能力 * * * * * * * * * Company Logo Company Logo Company Logo Company Logo * 以上的讨论表明单细胞分析大致包括单细胞的组分、表型以及它们的时间和空间特征这四个维度（图4）。对这四个维度的单细胞分析可以回答细胞相应组分有多少，在哪里，处在什么状态以及如何随时间变化这些问题，以认识细胞个体差异的分子基础以及细胞生命过程的时空动态信息。因此，单细胞分析技术作为全新的实验手段，其下一代技术应该是能高通量地精确识别、培养、追踪和俘获单细胞，可以动态精确地控制单细胞微环境，进而实现对目标细胞多方位和多尺度的研究和分析（图4红色箭头）。为了实现这个目标，一方面需要改进并融合现有的单细胞技术，另一方面还要持续的技术创新。 以上的讨论表明单细胞分析大致包括单细胞的组分、表型以及它们的时间和空间特征这四个维度（图4）。对这四个维度的单细胞分析可以回答细胞相应组分有多少，在哪里，处在什么状态以及如何随时间变化这些问题，以认识细胞个体差异的分子基础以及细胞生命过程的时空动态信息。因此，单细胞分析技术作为全新的实验手段，其下一代技术应该是能高通量地精确识别、培养、追踪和俘获单细胞，可以动态精确地控制单细胞微环境，进而实现对目标细胞多方位和多尺度的研究和分析（图4红色箭头）。为了实现这个目标，一方面需要改进并融合现有的单细胞技术，另一方面还要持续的技术创新。 * * * * * * * * * * * * * * * * 我们提出的方案是基于以下四种前沿技术的研发与集成：即活细胞单分子成像、超高分辨率荧光显微成像、单细胞相干拉曼散射无标记光学成像和单细胞微流控技术。 作为单细胞表型动态观察鉴定以及亚细胞精细构造和分子定位的方法，单细胞三维动态高精度显微成像有很好的时空分辨率和很高的灵敏度，可以检测细胞内含量极低的目标分子的运动和分布。但是在很多研究体系中，单细胞之间的内在差异和对外界环境的响应相差很大，既需要对每个单细胞进行细致的观察研究，又需要分析很多单细胞。这时候标准显微成像装置就显得通量太低。与微流控技术相结合，不但可以提高单细胞显微成像的通量，还能同时对单细胞进行各种操作和微环境控制。这种技术结合的效果将远大于1+1，在单细胞分析中应用前景非常广泛。 微流控平台提供了一种可能性使我们可以将单细胞的很多处理步骤以及检测和分析都集成到一个部件上。基于微流控的单细胞处理和操纵包括细胞培养，分离，束缚，标记，干扰，裂解和样品富集等，服务于特定细胞的高精度光学成像以及终点的组学分析。 在高时空分辨率光学显微成像分析的基础上，在微流控芯片上对单细胞实施定位、培养和处理，为成像分析提供观察对象，为下游的单细胞测序制备样品。最终实现单细胞时空动态信息与基因组、转录组、表观遗传组等信息的有机结合。 * 基于PDMS材料的微流控芯片透明而且有稳定的光学性质和很小的光学偏差及自发荧光，因此适合与光学显微成像技术结合起来，为活细胞成像提供一个绝好的平台，实现了高精度观察、高通量和微环境精确控制的有机结合。 聚焦的脉冲激光可以对单细胞快速裂解[114] 作为单细胞表型动态观察鉴定以及亚细胞精细构造和分子定位的方法，单细胞三维动态高精度显微成像有很好的时空分辨率和很高的灵敏度，可以检测细胞内含量极低的目标分子的运动和分布。但是在很多研究体系中，单细胞之间的内在差异和对外界环境的响应相差很大，既需要对每个单细胞进行细致的观察研究，又需要分析很多单细胞。这时候标准显微成像装置就显得通量太低。与微流控技术相结合，不但可以提高单细胞显微成像的通量，还能同时对单细胞进行各种操作和微环境控制。这种技术结合的效果将远大于1+1，在单细胞分析中应用前景非常广泛。 微流控平台提供了一种可能性使我们可以将单细胞的很多处理步骤以及检测和分析都集成到一个部件上。基于微流控的单细胞处理和操纵包括细胞培养，分离，束缚，标记，干扰，裂解和样品富集等，服务于特定细胞的高精度光学成像以及终点的组学分析。 目前单分子荧光技术和微流控的结合基本上只能用来分析单细胞裂解产物中的细胞组分，包括蛋白分子、细胞活素等，尚没有在微流控