科技项目(课题)申请报告（基因治疗.doc

计 划 类 别：_________ 项 目 编 号：_________ 计算机编号: _________ 漳科 技 项 目 ( 课 题 ) 申申 请 报 告 项目(课题)名称: 恶性血液病INK4b基因家 族甲基化实验与临床研究 申请单位(或申请者): 通 讯 地 址: 联 系 电 话: 申 请 日 期: _____2004年4月28日 科 学 技 术 局 订 填 表 说 明 项目与课题组 项目名称 恶性血液病INK4b基因家族甲基化实验与临床研究 起止年限 2004年 6月～ 2006 年 6 月 总投资 申请数 10万元 项 目 负 责 人 姓 名 性别 男 出生年月 新学专业 专业技术职称 课 题 组 人 员 总 数 高 级 中 级 初 级 辅助人员 13 3 5 5 承担单位 名 称 法人代表 通讯地址 联系电话 上年度产值 上年度利润 上年度交税额 主要参加单位 研究（制）的科技依据和意义[包括科技意义和应用前景、国内外研究概况、水平和发展趋势，学术思想，立论根据，特色或创新之处]。 科技意义、应用前景和立论根据： 细胞的增殖是通过细胞周期来实现的。细胞周期运行的核心是细胞周期引擎分子如CDK(cyclin dependent kinase)等有序地激活与失活, 细胞周期引擎分子的抑制剂称为CKI(Cyclin dependent kinase inhibitor),是CDKs的负调控因子,由CDKs,CKIs及CDKs的正调控因子cyclins组成的全酶复合物,即所谓的“驱动器”,推动着细胞周期的进程及各个时间的过渡。 通过精细的调控，准确、有序地出入各个周期时相成为细胞正常生长、代谢的关键，一旦调控失败,就意味着增殖的失控,最终导致癌化。因此,研究细胞周期的调控机理是研究肿瘤发生并最终治愈肿瘤的基础和关键。 细胞周期的调控是当前国际上肿瘤研究的热点，尤其是干预肿瘤细胞内信号传导、从而调控肿瘤细胞周期而达到阻断肿瘤细胞增殖，加速肿瘤细胞凋亡已引起广泛重视。CKIs的发现使我们对于细胞周期调控和检查点的功能有了更深刻的了解,同时,在阐明细胞癌变的分子机制方面也为我们提供了重要的线索。 INK4抑癌基因家族是CKI的家族成员，可特异地与CDK4或cyclin－CDK4复合物结合，从而抑制细胞由G1期进入S期。该家族基因组基因缺失或DNA甲基化，会抑制其表达，使其失去细胞周期负调控功能，导致恶性血液病的发生、发展。哺乳动物中p15ＩＮＫ4Ｂ是与ｐ16同源性很高的一个ＣＫＩ分子,大量肿瘤以及多种癌细胞系中的调查表明, p15ＩＮＫ4Ｂ基因的异常表达(如缺失、突变和重排等)在许多肿瘤及癌细胞系中存在,并与其中一些肿瘤的发展密切相关,这为确定p15ＩＮＫ4Ｂ作为一个新的抑癌基因提供了证据。在此基础上,进一步对p15ＩＮＫ4Ｂ在细胞周期中调控细胞增殖和分化机理的研究发现: p15ＩＮＫ4Ｂ能抑制一些肿瘤细胞的增殖,并可作为细胞生长抑制因子TGFβ发挥作用的中介者,另外在某些类型细胞的分化过程中, p15ＩＮＫ4Ｂ水平的上升与细胞分化表型的出现具有相关性。这些关于p15ＩＮＫ4Ｂ的研究进展为进一步阐明细胞周期调控及细胞癌变的分子机制提供了线索,并可能为p15ＩＮＫ4Ｂ运用于肿瘤的临床治疗提供理论与实验依据。 国内外研究概况、水平和发展趋势，学术思想1. 国外研究发现：多种肿瘤组织、细胞系中存在ｐ15的失活，ｐ15失活有缺失(deletion)、重排(rearrangement)、突变(mutation)等一些不同的机制，随着肿瘤细胞类型的不同，ｐ15失活频率亦有所不同。研究发现：在恶性血液病中包括白血病和淋巴瘤等，ｐ15的缺失是一种十分频繁的现象,甚至于在某些类型中ｐ15的缺失可作为一个诊断与指导治疗方案的指标.据报道,p15在Ｔ细胞急性淋巴母细胞白血病(TALL)原发性肿瘤中纯合缺失比例较高,与此类似的情况还有儿童前体Ｂ细胞急性淋巴母细胞白血病(preBALL)、儿童ALL、成人Ｔ细胞白血病(ATL),以及preALL细胞系JKB2和多种恶性Ｔ细胞系.这些缺失也常常伴随有p16的基因改变.其中,在成人Ｔ细胞白血病和儿童ALL中,还发现ｐ15/ｐ16缺失与肿瘤病人的不良预后之间有着统计学的重要联系,可以将这种缺失作为预测病情复发和生存期长短的可靠因子.在某些淋巴瘤及其细胞中,p15的纯合缺失也较为普遍,例如:原发恶性淋巴癌,Ｂ细胞非何杰金氏淋巴瘤BNHL细胞系. 除上述的ｐ15基因改变的情况之外,还有一种ｐ15基因失去转录活性而不影响其一级结构的是在5′CPG岛区域发生大面积的甲基化.这在T ALL、神经胶质瘤、ＭＤＳ中均有发现.p15基因的高度甲基化与Ｍ