常见问题和解答.PDFVIP

常见问题及解答 1.镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？ 答：因为低倍镜下视野较大，易于发现目标和确定检查的位置，而如果直接用高倍镜 观察，因其视野较小，不易找到观察的目标，浪费时间。 2.简述线粒体詹纳斯绿B 活体染色原理？ 答：线粒体是细胞内一种重要细胞器，是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动 所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的 染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯 绿B 是线粒体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿 色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。 3.简述液泡系活体染色原理？ 答：动物软骨细胞内含有较多的粗面内质网和发达的高尔基复合体，能合成与分泌软 骨粘蛋白及胶原纤维等，因而液泡系发达。中性红是液泡系特殊的活体染色剂，只将液泡 系染成红色，在细胞处于生活状态时，细胞质及核不被染色，中性红染色可能与液泡中的 蛋白有关。 4.微丝观察实验中，1%TritonX-100 处理细胞的作用是什么？此实验能否看到微管和 中间纤维？作出理由。 答：（1）1%TritonX-100 作用是为了抽提细胞骨架以外的蛋白质，从而使骨架图像更 加清晰。（2 ）不能看到微管和中间纤维。因为微管、微丝和中间纤维是由不同的的蛋白质 组成的，微管、中间纤维的组装蛋白都被1%的TritonX-100 抽提出去，且没有加入促进微 管、中间纤维组装的试剂，所以看不到它们。 6.简述Feulgen 反应的原理及作好本实验的关键？ 答：（1）DNA 经酸水解，其上的嘌呤碱和 脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff 试剂（无色品红亚硫酸溶液）反应，形成紫红色的化合物，使细胞内含有DNA 的部位呈 紫红色阳性反应。紫红色的产生，是由于反应产物的分子内含有醌基，醌基是一个发色团， 所以具有颜色。该反应对DNA 具有专一性。（2 ）Feulgen 反应成功的关键在于Schiff 试剂 的质量。Schiff 试剂只能选用注明“DNA 染色反应用”的碱性品红才行。 7.简述细胞凝集反应的原理？ 答：凝集素是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞 和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间 形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 8.分析在小鼠肝细胞分离实验中，EDTA 对实验的影响？ 答：EDTA 是一种金属螯合剂，它可以和钙镁离子相结合，而钙镁离子是细胞之间连 结的重要的金属离子，除去钙镁离子将影响到细胞之间的结合，因此可用EDTA 来破坏细 胞之间的连结，从而达到分离细胞的目的。 9 ．显微镜视野中的污染物，如何判断其是在目镜、物镜还是玻片上？ 答：移动载物台，动则在玻片上；转动目镜镜头，动则在目镜上； 否则在物镜上。 10．巨噬细胞吞噬红细胞后，会如何进一步处理？ 答：含红细胞的吞噬泡与巨噬细胞内的初级溶酶体融合，进行消化。 11．土豆凝集素的实质是什么？简述其在土豆细胞中的合成和分泌的可能途径？它是 如何使鸡红细胞发生凝集的？ 答：是一种糖蛋白；内质网合成、糖基化，高尔基体内进一步加工、分选，以分泌泡 形式与膜融合，胞吐；它能与鸡红细胞膜表面的糖链专一性结合。 12．比较Giemsa 染色和Janas Green B 染色（注意染色操作和结果的区别）？ 答：⑴ Giemsa 染色前，细胞须固定（染死细胞），主要染的是核、染色质；⑵ Janas Green B 染的是活细胞（染色前不用固定），主要染的是线粒体。 13．怎样根据细胞膜渗透性实验结果分析确定物质进入细胞的速度？物质进入细胞的 快慢有什么规律？ 答：⑴ 测量溶血时间；⑵ 主要取决于分子的大小和极性；小分子比大分子容易穿膜， 非极性分子比极性分子易穿膜，而带电荷的离子跨膜运动则通常需要转运蛋白的协助。 14．一家科研单位获得了一头转基因水牛，要求你对其进行染色体核型分析（观察染 色体的数目、大小、形态特征等）并与普通水牛的核型进行比较。所提供的材料是两种牛 的耳缘静脉血，需要采用外周血淋巴细胞核型分析的方法，请叙述你实验设计的主要步骤 及各步的基本原理。 答：外周血培养——秋水仙素