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最新资料推荐 最新资料推荐 PAGE PAGE # / 12 病理石蜡切片的制作 病理石蜡切片的制作 病理石蜡切片的制作包含两个部分： 石蜡组织块制作和切片制作。 （一）石蜡组织块制作 1 、取材。 、固定。 TOC \o 1-5 \h \z 、脱水、透明及浸蜡（具体步骤见表） 。 人体尸检、 活检及常用实验动物组织脱水、 透 明及浸蜡时间表 步 骤 操作项目 尸检组织 活检组织 小 鼠 大 鼠 家 兔 （ 1） 60%乙醇 无 无 15min 20min 30min （ 2） 70% 乙醇 4~10h 1~2h 15min 20min 30min （ 3） 80%乙醇 4~10h 1~2h 20min 30min 40min （ 4） 90%乙醇 4~10h 1~2h 20min 30min 40min （ 5） 95%乙醇Ⅰ 4~10h 1~2h 20min 30min 40min （ 6） 95%乙醇Ⅱ 4~10h 1~2h 20min 20min 30min （ 7） 无水乙醇Ⅰ 2~4h 0.5~1h 20min 30min 40min （ 8） 无水乙醇Ⅱ 2~4h 0.5~1h 20min 30min 40min （ 9） 二甲苯Ⅰ 1~2h 15min~0.5h 5min 8min 10min （ 10） 二甲苯Ⅱ 0.5~1h 15min 3min 5min 5min （ 11） 石蜡Ⅰ 0.5~1h 0.5~1h 10min 15min 20min （ 12） 石 蜡Ⅱ 1~2h 1~2h 20min 25min 30min （ 13） 石蜡Ⅲ 1~2h 1~2h 30min 30min 40min 4 、包埋 【注意事项】 1 ．一般实质性脏 器的组织及肿瘤组织应把最大切面朝下包埋；食管、胃、肠等组织须 将管壁横断面朝下包埋，若在同一蜡块．包埋数块管壁组织时，应平 行横埋且黏膜面（内膜）的方向应一致，以便切片及观察。 ．同一蜡块包埋多个组织块时，组织的性质应相同，方向要一 致，不能把大小、 厚薄差别悬殊的组织包埋在一起，组织块间的距离 不能太大。 ．皮肤、骨等难切组织及需要连续切片的组织都应单独包埋。 ． 神经、 脊髓及需要定向包埋的组织应注意组织块的相互关系。 ．包埋（尤其在室温较低的情况下）操作应迅速，防止组织块 变凉、蜡液凝结及出现气泡，组织块与蜡液不能很好凝固定在一起， 导致组织与蜡分离。 ．遇有管腔或空洞标本与小标本同埋一个蜡块时，不能将小标 本放入其他标本的管腔或空洞内。 （二）石蜡切片制作 用切片机将石蜡包埋的组织块（蜡块）制 成适宜厚度的切片，是目前在病理学科．最常用的一种制片方法。 切片厚度为一般 4~6m。 【切片前的准备】 1 、修切蜡块 切片前应先修块，即切去组织 周围过多的石蜡，一般留下约 2mm 宽度的蜡边为宜。 注意蜡块不能留得太窄，在切片时易损坏组织；蜡边不能留得太 多，否则影响展片。 室温过高时，可将修好的蜡块放到冰箱．冷却一定时间。 、切片用品准备 （ 1）切片刀： 预先磨好切片刀备用或切片前更换新的一次性切片。 （ 2）载物片： 载物片经清洁液、 95%乙醇处理后备用。 （ 3）展片仪： 加入温水，接通电源，调整温度。 （ 4）其他用品： 准备好毛笔、记号笔、镊子、冰块等。 【切片制作过程】 以使用旋转式切片机石蜡切片为例： ．将切片刀装在刀架上，后将蜡块装在切片机固定装置上。 调整蜡块与刀至合适位置 （刀刃与蜡块切面呈 5 夹角） 旋转式切 片机切取组织，是由下向上切，为得到完整的切片，防止组织出现刀 纹裂缝，应将组织硬脆难切的部分放在上端（如皮肤组织，应将表皮 部分向上。 而胃肠等组织，应将浆膜面朝上） 。 ．左手执手笔，右手旋转切片机旋转轮。 先粗切标本，直到暴露出组织最大切面（但对小标本不要修切得 太多，以免将整个组织块修切掉） 。 再连续旋转切出蜡带，左手持毛笔将蜡片带下端轻轻托起，右手 用镊子夹起蜡带上端， 正面向上放入展片仪水盒内， 展片温度根据使 用的石蜡熔点进行调整，一般水温为 45℃左右，待蜡片带．的组织 展平后，即可进行分片和捞片。 对于展片困难的切片经 30%的乙醇初展后，再用载玻片捞起蜡带 放人展片仪水盒内可使切片更易展平。 在夏季切片时可用冰块冷却切片刀和组织块，减少切片刀与组织 块在切片过程．产生的热时，使石蜡保持合适的硬度以利于切片。 ．捞起切片后，写上编号。 捞片时注意切片的位置， 一般切片的． 心位于载物片右侧 1/3 与 2/3 交界处为佳，并注意整齐美观。 ． 烤箱 60℃左右烘烤切片 30min ， 对血凝块和皮肤组织应及时 烤片，烤片温度应稍低；脑组织切片捞出后直立晾干，再烤片，否则 产生气泡。 【注意事项】 1